Naším hlavním zjištěním bylo, že bovinní perikard konzervovaný v glutaraldehydu nevykazoval žádné změny ve své struktuře, když byl nasazen různými stranami k lumen cévy. Při jeho výrobě byla dodržena hrubá standardizace výroby a kontroly kvality. Aby se omezily proměnné, které by mohly ovlivnit výsledky, byl perikard získán pouze z jednoho zdroje a záplata byla vyrobena pomocí stejné formy.
Důležité je poznamenat přítomnost expanze maloobchodu ve stěně aorty. V místě implantátu došlo k dilataci materiálu s vytvořením aneuryzmatu stěny, které bylo výrazně vyšší, když byla hladká plocha otočena ke světlu aorty. Dále jsme pozorovali, že náplast z hovězího perikardu byla dobře integrována do stěny aorty, což potvrzuje to, co pozorovali Pires et al. Struktura záplaty zajištěná chirurgickým maloobchodem při implantaci do aorty psů podporuje jasné a přesné hranice v zachovaném tvaru a je dobře definovaná již na konci prvního měsíce po operaci . Tento typ zákroku je také náchylný k infekcím .
Ve skupině, kde byla drsná plocha otočena do aorty, jsme pozorovali vytvoření krycí vrstvy na vnitřním povrchu s větší plasticitou, modelující elastickou šlachu a tvorbu kosti, která poskytovala chirurgické záplatě větší odolnost proti tahu a bránila jejímu rozšíření. Pires a kol. předpokládali, že vnitřní apoziční fibróza pochází z vláknitého uspořádání krevních složek uložených na povrchu retailu, protože tento plán nebyl v žádném případě pozorován u retailu implantovaného do perikardu. Ve skupině, u níž byl plochý okraj retailu obrácen do aorty, byl tento jev intenzivnější na linii šití a souvisel s drsností oblasti a lokálním uvolňováním tromboplastinu poškozenými tkáněmi. Naše výsledky naznačují, že zvrásněná plocha retailu by usnadňovala zachycení a adhezi krevních složek přes jeho povrch s následnou asimilací uvolněním destičkových faktorů a sekundárně tromboplastinem uvolněným z poškozených tkání . Ověřili jsme také, že v této skupině došlo k vytvoření tenké vnitřní krycí vrstvy, což vedlo k dilataci oblasti operačního náplasti. Tyto výsledky mohou naznačovat, že vnitřní přiložení fibrózy by podpořilo maloobchodní prodej a zpevnilo strukturu chirurgické záplaty. Její histologická struktura odhaluje hustou vláknitou pojivovou tkáň ve tvaru vzoru šlachy s velkou odolností v tahu.
Výzkumníci nabídli různé hypotézy, které vysvětlují, proč glutaraldehyd pomohl zachovat hovězí perikard před změnami jeho struktury při nasazení různými stranami k lumen cévy. Ishihara et al uvedli, že hovězí perikard ošetřený glutaraldehydem ztrácí mezotelové buňky serózního povrchu a odhaluje submezoteliální vrstvu hladké pojivové tkáně, zatímco Pires et al pozorovali, že povrch perikardu je pokryt vrstvou dlaždicových buněk a vláknité pojivové tkáně, kterou nazvali vnitřní apoziční tkání. Na druhé straně Schoen et al uvádějí, že agregace trombocytů, na perikardiální membráně, by byla faktorem urychlujícím proces kalcifikace. Pozorovali jsme, že na obou stranách maloobchodního prodeje implantovaného zvířatům se vytvořil vnitřní povrch tvořený endotelem. Pokud však byl retail implantován drsnou stranou směřující k povrchu lumen, došlo k jeho izolaci od hovězího perikardu prostřednictvím krve, čímž se snížila intenzita a výskyt dilatace aorty ve vztahu k sousední aortě. Bez tohoto krytí bychom očekávali nárůst kalcifikace. Kromě toho jsme pozorovali, že tato vrstva tkáně byla odlišena od ostatních stran a lépe vycvičena, když měla zvrásněnou tvář směrem k lumen. Kromě toho modelování elastické šlachy a tvorba kosti, tvořily chirurgickou záplatu na úrovni maloobchodního hovězího perikardu, která měla dobrou odolnost a byla dobře integrována do stěny aorty, pravděpodobně díky uniformitě vyplývající z procesu formování.
Přítomnost osteokartilaginózní metaplazie ve fibrózní vrstvě vnitřního přírůstku byla pozorována pouze v jednom případě jako izolované ložisko, vyskytující se ve skupině, u které byla drsná tvář obrácena do aorty. Tyto údaje nejsou v souladu se zjištěními Pirese et al, kteří popsali velké množství vápníku přítomného ve vnitřní vrstvě apozice. Autoři předpokládali, že tato kalcifikace představuje osteokartilaginózní metaplazii a osifikaci fibrózní tkáně pokrývající štěp, což svědčí o přeměně fibroblastů v osteoblasty. Nicméně jsme přesvědčeni, že naše nálezy jsou platné. Naši metodiku potvrdili Sucu et al, kteří prokázali, že použití mikroskopických řezů sloučených pro hodnocení kalcifikace je přesnější než použití chemické metody extrakce vápníku z náplasti.
Kalcifikace biologické tkáně je hlavní příčinou dysfunkce bioprotéz. Podle Schoena et al , Chandy et al , Vasudeva et al a Pirese et al je tato kalcifikace multifaktoriální jev, který však není dobře definován a liší se u různých zvířecích modelů. Autoři poukázali na to, že kalcifikace v hovězím perikardu použitém jako cévní záplata představuje jinou konotaci kalcifikace než u chlopenních protéz, protože znamená snížení pohyblivosti lístků, což má za následek dysfunkci protézy, která nebyla pozorována u cévních štěpů.
Pozorovali jsme kalcifikaci retailů bez ohledu na stranu směřující do lumen; totéž platilo, pokud jde o retail implantovaný do peritonea zvířete. Tato zjištění však nejsou v souladu se zjištěními Schoena et al a Rossiho et al, kteří zjistili kalcifikaci retailu implantovaného potkanům. Autoři popsali kalcifikaci hovězího perikardu od 24 hodin po implantaci a postupně se s časem zvyšovala, ale neuvedli přítomnost vnitřní tkáňové apozice. U náplastí implantovaných do peritonea (bez přímého kontaktu s krevním řečištěm) jsme tuto tkáň nenašli. Tato zjištění jsou v souladu se zjištěními Gabbaye et al , Bortolottiho et al a Pirese et al , kteří uvedli hlavní vliv místa implantace hovězího perikardu ošetřeného glutaraldehydem a jeho přímého kontaktu s krevním řečištěm.
Použili jsme hovězí perikard vyrobený společností Braile Biomedica. Stejnou náplast však vyrábí i několik dalších průmyslových odvětví. Některá průmyslová odvětví používají speciální postupy ke snížení výskytu kalcifikace. Například společnost Synovis, která vyrábí Vascu-Guard , postupuje podle Apex-Processing. Stručně řečeno, při tomto postupu je hladina zbytkového glutaraldehydu pod mezí detekce sofistikovanými analytickými metodami, které jsou nyní k dispozici (< 0,5 ppm), a výrobky procházející Apex-Processing mají čtyřikrát nižší úroveň kalcifikace než řada konkurenčních materiálů včetně výrobků ošetřených konvenčním způsobem.
Podle našich údajů nedošlo k žádné kalcifikaci v maloobchodě implantovaném do pobřišnice téměř u poloviny zvířat. Peritoneální kalcifikace je vzácný stav vzniklý u pacientů s uremií na kontinuální ambulantní peritoneální dialýze. Jakmile je zjištěna peritoneální kalcifikace, je nezbytné posoudit, zda se nerozvíjí enkapsulující peritoneální skleróza .
Hovězí perikard se také implantuje pro cévní rekonstrukce ve femorální nebo karotické tepně jako patchplastiky a žilní patch angioplastiky . Kromě toho se hovězí perikard používá nejen v kardiovaskulární chirurgii, ale také v chirurgii kýly nebo hrudníku . Na základě našich údajů potvrzujeme použití drsného obličeje v těchto typech chirurgie. Navrhujeme budoucí studie k prozkoumání této možnosti.
Naše šetření představuje některé body, které by měly být řešeny: neprovedli jsme analýzu krve, tj. hladiny cholesterolu, triglyceridů a glukózy v krvi. Naším cílem však bylo zaměřit se pouze na kalcifikaci. Hematoxylin a eosin není nejlepší metodou pro vyšetřování kalcifikace tkání a nekvantifikuje proteiny související s fibrózou. Na druhou stranu se jedná o první studii, která zkoumá využití různých stran hovězího perikardu konzervovaného v glutaraldehydu jako cévní záplaty. Ošetření glutaraldehydem, výsledná zvýšená tuhost ošetřené tkáně a přítomnost fixovaného buněčného materiálu ve tkáni jsou faktory, které přispívají ke kalcifikaci kardiovaskulárních implantátů. Mikrobiologické vyšetření náplasti jsme neprováděli. Tento postup navrhujeme pro budoucí studie. Doba pobytu hovězí náplasti v oběhu nebyla konstantní, případně tento faktor může být zkreslením našich zjištění
.