Přímá fluorescenční protilátka

Tento článek potřebuje k ověření další citace. Pomozte prosím vylepšit tento článek přidáním citací na spolehlivé zdroje. Materiál bez zdrojů může být zpochybněn a odstraněn.
Najít zdroje: „Přímá fluorescenční protilátka“ – zprávy – noviny – knihy – scholar – JSTOR (červenec 2009) (Learn how and when to remove this template message)

Přímá fluorescenční protilátka (DFA nebo dFA), známá také jako „přímá imunofluorescence“, je protilátka, která byla označena v testu přímé fluorescenční protilátky. Její název je odvozen od skutečnosti, že přímo testuje přítomnost antigenu pomocí označené protilátky, na rozdíl od western blottingu, který používá nepřímou metodu detekce, kdy se primární protilátka váže na cílový antigen, přičemž sekundární protilátka je namířena proti primární a k sekundární protilátce je připojena značka.

Přímá FA obarvená na nátěru otisku myšího mozku odhaluje přítomnost bakterie Chlamydia psittaci. 400X.

K dispozici jsou komerční testovací soupravy DFA, které obsahují fluorescenčně značené protilátky, navržené tak, aby specificky cílily na jedinečné antigeny přítomné u bakterií nebo virů, které však nejsou přítomny u savců (eukaryot). Tuto techniku lze použít k rychlému určení, zda má subjekt konkrétní virovou nebo bakteriální infekci.

V případě respiračních virů, z nichž mnohé mají podobné široké příznaky, lze detekci provést pomocí vzorků výplachu nosu subjektu s podezřením na infekci. Ačkoli lze získat vylučující se buňky v dýchacích cestách, jsou často v nízkém počtu, a proto lze přijmout alternativní metodu, kdy lze kompatibilní buněčnou kulturu vystavit infikovaným vzorkům výplachů nosu, takže pokud je virus přítomen, lze jej vypěstovat ve větším množství, které pak může poskytnout jasnější pozitivní nebo negativní výsledek.

Stejně jako u všech typů fluorescenční mikroskopie je třeba určit správnou absorpční vlnovou délku, aby bylo možné excitovat fluoroforovou značku připojenou k protilátce a detekovat vyzařovanou fluorescenci, která ukazuje, které buňky jsou pozitivní na přítomnost detekovaného viru nebo bakterie.

Přímou imunofluorescenci lze použít k detekci depozit imunoglobulinů a proteinů komplementu v biopsiích kůže, ledvin a jiných orgánů. Jejich přítomnost svědčí o autoimunitním onemocnění. Pokud je testována kůže nevystavená slunci, je pozitivní přímá IF (tzv. Lupus band test) důkazem systémového lupus erythematodes. Přímou fluorescenční protilátku lze také použít k detekci parazitárních infekcí, jak to poprvé učinil Sadun, et al (1960)

.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.