Direkt fluoreszierender Antikörper

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Quellen finden: „Direct fluorescent antibody“ – news – newspapers – books – scholar – JSTOR (July 2009) (Learn how and when to remove this template message)

Ein direkt fluoreszierender Antikörper (DFA oder dFA), auch bekannt als „direkte Immunfluoreszenz“, ist ein Antikörper, der in einem direkt fluoreszierenden Antikörpertest markiert wurde. Der Name leitet sich von der Tatsache ab, dass das Vorhandensein eines Antigens direkt mit dem markierten Antikörper getestet wird, im Gegensatz zum Western Blotting, das eine indirekte Nachweismethode verwendet, bei der der primäre Antikörper das Zielantigen bindet, wobei ein sekundärer Antikörper gegen den primären gerichtet ist und ein Tag an den sekundären Antikörper angehängt ist.

Ein mit direktem FA gefärbter Abdruck des Mäusegehirns zeigt das Vorhandensein des Bakteriums Chlamydia psittaci. 400X.

Im Handel sind DFA-Testkits erhältlich, die fluoreszenzmarkierte Antikörper enthalten, die speziell auf einzigartige Antigene abzielen, die in Bakterien oder Viren vorhanden sind, aber nicht in Säugetieren (Eukaryoten). Mit dieser Technik kann schnell festgestellt werden, ob eine Person an einer spezifischen viralen oder bakteriellen Infektion leidet.

Im Falle von Atemwegsviren, von denen viele ähnliche, breit gefächerte Symptome aufweisen, kann der Nachweis anhand von Nasenspülproben der Person mit der vermuteten Infektion durchgeführt werden. Obwohl Shedding-Zellen im Respirationstrakt erhalten werden können, sind sie oft in geringer Zahl vorhanden, so dass eine alternative Methode angewandt werden kann, bei der kompatible Zellkulturen infizierten Nasenspülproben ausgesetzt werden können, so dass das Virus, wenn es vorhanden ist, zu einer größeren Menge herangezüchtet werden kann, was dann einen deutlicheren positiven oder negativen Befund ergibt.

Wie bei allen Arten der Fluoreszenzmikroskopie muss die richtige Absorptionswellenlänge bestimmt werden, um den an den Antikörper gebundenen Fluorophor anzuregen und die abgegebene Fluoreszenz zu detektieren, die anzeigt, welche Zellen positiv für das Vorhandensein des nachgewiesenen Virus oder der Bakterien sind.

Direkte Immunfluoreszenz kann verwendet werden, um Ablagerungen von Immunglobulinen und Komplementproteinen in Biopsien von Haut, Niere und anderen Organen nachzuweisen. Ihr Vorhandensein ist ein Hinweis auf eine Autoimmunerkrankung. Wenn Haut, die nicht der Sonne ausgesetzt war, getestet wird, ist ein positiver direkter IF (der so genannte Lupus-Band-Test) ein Hinweis auf systemischen Lupus erythematodes. Direkte fluoreszierende Antikörper können auch zum Nachweis von Parasiteninfektionen verwendet werden, wie dies von Sadun et al. (1960) als Pionierarbeit geleistet wurde.

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