Periodsäure-Schiff (PAS) ist eine weitere häufig verwendete Spezialfärbung im histologischen Labor.
Was färbt PAS?
(1) Polysaccharide: Diese Technik wird häufig verwendet, um Polysaccharide zu identifizieren – diese Makromoleküle bestehen aus Monosaccharideinheiten, die durch kovalente Bindungen verbunden sind. Das wichtigste Polysaccharid, das mit Hilfe der Histologie-Färbung in menschlichen und tierischen Gewebeschnitten identifiziert werden kann, ist Glykogen. Es ist in zahlreichen Geweben vorhanden, darunter Skelettmuskel, Herzmuskel, Leber und Niere.
(2) Neutrale Schleimstoffe: Es wird auch häufig verwendet, um neutrale Schleimsubstanzen zu färben und zu identifizieren. Dazu können Glykoproteine, Glykolipide und neutrale Schleimstoffe gehören, die von Epithelzellen in verschiedenen Organen produziert werden.
(3) Gewebebasismembranen: Diese PAS-positiven dünnen Schichten aus retikulärem Bindegewebe verankern und stützen Epithel und Endothel am darunter liegenden Bindegewebe.
(4) Pilzorganismen: Die Zellwände einiger Pilzorganismen enthalten einen hohen Anteil an Kohlenhydraten und färben ebenfalls PAS-positiv. Dies funktioniert jedoch nur bei lebenden Pilzen.
Allgemeine Prinzipien der Färbung
Die Reaktivität der PAS-Technik beruht auf der Struktur der Monosaccharid-Einheiten.
Bei der ersten Reaktion der Färbung wirkt eine periodische Säure als Oxidationsmittel, um die Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindungen zwischen zwei benachbarten Hydroxylgruppen zu oxidieren. Dadurch entstehen Schiffsche reaktive Aldehydgruppen.
In der zweiten Reaktion reagiert der Gewebeschnitt mit Schiffschem Reagenz. Dieses besteht aus einer Mischung aus basischem Fuchsin, Salzsäure und Natriummetabisulfit. Das basische Fuchsin in der Mischung reagiert mit neu gebildeten Aldehydgruppen im Gewebe und erzeugt eine leuchtende Magentafarbe.
Wenn der Schnitt schließlich in Wasser gespült wird, erzeugen die gebundenen Fuchsinmoleküle im Gewebe eine leuchtende Magentafarbe. Die Intensität der Farbe ist proportional zur Konzentration der ursprünglich in den Monosaccharideinheiten vorhandenen Hydroxylgruppen.
Hämatoxylin wird dann in der Regel als Gegenfärbung verwendet, um andere Gewebeelemente sichtbar zu machen. Wenn PAS zum Nachweis von Pilzorganismen verwendet wird, wird jedoch eine hellgrüne Gegenfärbung bevorzugt.
Der Verdau von Diastase (Alpha-Amylase) kann ebenfalls zur Unterstützung der Diagnose von Glykogenspeicherkrankheiten verwendet werden. Diastase hydrolysiert Stärke, Glykogen und Abbauprodukte, die aus diesen Gewebepolysacchariden stammen. Im Vergleich zu einem Objektträger mit glykogenhaltigem Gewebe weist ein Diastase-Extraktionsobjektträger keine sichtbare PAS-Färbung auf.
| Histologisches Merkmal | Farbe mit PAS-Färbung |
| Glykogen, Basalmembranen, Schleimstoffe, Pilzorganismen | Magenta |
| Kerne | Blau (mit Hämatoxylin-Gegenfärbung) |
| Andere Gewebeelemente | Grün (mit hellgrüner Gegenfärbung) |
Wer verwendet die PAS-Färbung?
Diese Färbung wird häufig für Diagnose- und Forschungszwecke verwendet. So können Forscher, die sich mit Glykogenspeicherkrankheiten oder Erkrankungen der Basalmembran befassen, routinemäßig PAS-gefärbte Gewebeschnitte untersuchen, um die entsprechenden Elemente in den interessierenden Geweben zu bewerten.
In diagnostischen Labors verwenden Pathologen diese Färbung häufig, um Fragen zu beantworten, die sich nach der Untersuchung von routinemäßig mit Hämatoxylin und Eosin gefärbten Schnitten ergeben können. Sie kann insbesondere bei der Diagnose von:
- Glykogenspeicherkrankheiten verwendet werden: Dabei handelt es sich um Erkrankungen, bei denen übermäßige Mengen an Glykogen in der Leber, den Muskeln oder den Nieren gespeichert werden. PAS wird in der Klinik häufig routinemäßig zum Nachweis von Glykogenansammlungen in Biopsien dieser Gewebe verwendet.
- Tumore: Glykogengranula können auch in einigen Tumoren vorhanden sein, einschließlich einiger, die in Geweben wie der Bauchspeicheldrüse, der Lunge und der Blase entstehen.
- Pilzinfektion: PAS kann verwendet werden, um einige Pilzorganismen in Gewebeschnitten sichtbar zu machen.
- Basismembranen: Da PAS zur Hervorhebung der Basalmembranen von Geweben verwendet werden kann, kann es zur Identifizierung von Erkrankungen eingesetzt werden, bei denen eine Schwäche oder eine fehlerhafte Funktion der Basalmembranen vorliegt – wie bei einigen glomerulären Erkrankungen der Niere.
Wofür wird PAS in Ihrem Labor am häufigsten verwendet?
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