Anticuerpo fluorescente directo

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Un anticuerpo fluorescente directo (DFA o dFA), también conocido como «inmunofluorescencia directa», es un anticuerpo que ha sido marcado en una prueba de anticuerpos fluorescentes directos. Su nombre deriva del hecho de que comprueba directamente la presencia de un antígeno con el anticuerpo marcado, a diferencia del western blot, que utiliza un método indirecto de detección, en el que el anticuerpo primario se une al antígeno diana, con un anticuerpo secundario dirigido contra el primario, y una etiqueta unida al anticuerpo secundario.

El frotis de impresión de cerebro de ratón teñido con FA directa revela la presencia de la bacteria Chlamydia psittaci. 400X.

Se dispone de kits comerciales de pruebas DFA, que contienen anticuerpos marcados con fluorescencia, diseñados para dirigirse específicamente a antígenos únicos presentes en la bacteria o el virus, pero que no están presentes en los mamíferos (eucariotas). Esta técnica puede utilizarse para determinar rápidamente si un sujeto tiene una infección viral o bacteriana específica.

En el caso de los virus respiratorios, muchos de los cuales presentan síntomas generales similares, la detección puede llevarse a cabo utilizando muestras de lavado nasal del sujeto con la presunta infección. Aunque se pueden obtener células excretoras en el tracto respiratorio, a menudo es en un número bajo, por lo que se puede adoptar un método alternativo en el que se puede exponer un cultivo celular compatible a muestras de lavado nasal infectadas, por lo que si el virus está presente se puede cultivar hasta una cantidad mayor, lo que puede dar una lectura positiva o negativa más clara.

Como en todos los tipos de microscopía de fluorescencia, es necesario determinar la longitud de onda de absorción correcta para excitar la etiqueta fluorófora unida al anticuerpo y detectar la fluorescencia emitida, que indica qué células son positivas para la presencia del virus o la bacteria que se está detectando.

La inmunofluorescencia directa puede utilizarse para detectar depósitos de inmunoglobulinas y proteínas del complemento en biopsias de piel, riñón y otros órganos. Su presencia es indicativa de una enfermedad autoinmune. Cuando se analiza la piel no expuesta al sol, un IF directo positivo (la llamada prueba de la banda del lupus) es una prueba de lupus eritematoso sistémico. El anticuerpo fluorescente directo también puede utilizarse para detectar infecciones parasitarias, como lo hicieron por primera vez Sadun, et al. (1960).

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