El ácido periódico de Schiff (PAS) es otra tinción especial muy utilizada en el laboratorio de histología.
¿Qué tiñe el PAS?
(1) Polisacáridos: La técnica se utiliza comúnmente para identificar polisacáridos- estas macromoléculas están compuestas por unidades de monosacáridos unidos por enlaces covalentes. El principal polisacárido identificado mediante tinción histológica en secciones de tejidos humanos y animales es el glucógeno. Está presente en numerosos tejidos, como el músculo esquelético, el músculo cardíaco, el hígado y el riñón.
(2) Sustancias mucosas neutras: También se suele utilizar para teñir e identificar sustancias mucosas neutras. Estas pueden incluir glicoproteínas, glicolípidos y mucinas neutras, que son producidas por las células epiteliales en diferentes órganos.
(3) Membranas basales de los tejidos: Estas finas capas de tejido conectivo reticular, positivas al PAS, anclan y sostienen el epitelio y el endotelio al tejido conectivo subyacente.
(4) Organismos fúngicos: Las paredes celulares de algunos organismos fúngicos contienen altos niveles de carbohidratos, y también se tiñen con PAS positivo. Sin embargo, esto sólo funciona en hongos vivos.
Principios generales de la tinción
La reactividad de la técnica PAS se basa en la estructura de las unidades de monosacáridos.
La primera reacción en la tinción implica que el ácido periódico actúe como agente oxidante para oxidar los enlaces carbono-carbono entre dos grupos hidroxilos adyacentes. Esto produce grupos aldehídos reactivos de Schiff.
En la segunda reacción, la sección de tejido reacciona con el reactivo de Schiff. Éste comprende una mezcla de fucsina básica, ácido clorhídrico y metabisulfito de sodio. La fucsina básica de la mezcla reacciona con los grupos aldehídicos recién formados en el tejido para producir un color magenta brillante.
Por último, cuando se aclara la sección en agua, las moléculas de fucsina unidas en el tejido producen un color magenta brillante. La intensidad del color es proporcional a la concentración de grupos hidroxilos originalmente presentes en las unidades de monosacáridos.
La hematoxilina se suele utilizar como contratinción para visualizar otros elementos del tejido. Sin embargo, cuando se utiliza el PAS para demostrar organismos fúngicos, se prefiere una contratinción verde claro.
La digestión con diastasa (alfa-amilasa) también puede utilizarse para ayudar en el diagnóstico de las enfermedades de almacenamiento de glucógeno. La diastasa hidroliza el almidón, el glucógeno y los productos de descomposición que se originan en estos polisacáridos tisulares. Cuando se compara con un portaobjetos de tejido que contiene glucógeno, un portaobjetos de extracción de diastasa no tendrá una tinción PAS visible.
| Característica histológica | Coloración con tinción PAS |
| Glicógeno, membranas basales, sustancias mucosas, organismos fúngicos | Magenta |
| Núcleos | Azul (con contratinción de hematoxilina) |
| Otros elementos tisulares | Verde (con contratinción verde claro) |
¿Quién utiliza la tinción PAS?
Esta tinción se utiliza ampliamente tanto para fines de diagnóstico como de investigación. Por ejemplo, los investigadores que estudian las enfermedades de almacenamiento de glucógeno o las enfermedades de la membrana basal pueden examinar rutinariamente secciones de tejidos teñidas con PAS para evaluar estos elementos respectivos en los tejidos de interés.
En los laboratorios de diagnóstico, los patólogos suelen utilizar esta tinción para ayudar a responder a las preguntas que puedan surgir tras examinar secciones rutinarias teñidas con hematoxilina y eosina. En particular, puede utilizarse para ayudar en el diagnóstico de:
- Enfermedades de almacenamiento de glucógeno: Se trata de condiciones en las que se almacenan cantidades excesivas de glucógeno en el hígado, los músculos o el riñón. El PAS suele utilizarse de forma rutinaria en la clínica para demostrar la acumulación de glucógeno en las biopsias de estos tejidos.
- Tumores: Los gránulos de glucógeno también pueden estar presentes en algunos tumores, incluidos algunos de los que surgen en tejidos como el páncreas, el pulmón y la vejiga.
- Infección fúngica: El PAS puede utilizarse para visualizar algunos organismos fúngicos en secciones de tejido.
- Membranas basales: Dado que el PAS puede utilizarse para resaltar las membranas basales de los tejidos, puede utilizarse para identificar trastornos en los que hay una debilidad o un funcionamiento incorrecto de las membranas basales – como en el caso de algunas enfermedades glomerulares en el riñón.
¿Para qué se utiliza más habitualmente el PAS en su laboratorio?
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