A periódusos sav-Schiff (PAS) egy másik gyakran használt speciális festék a szövettani laboratóriumban.
Mit fest a PAS?
(1) Poliszacharidok: A technikát általában a poliszacharidok azonosítására használják – ezek a makromolekulák kovalens kötésekkel összekapcsolt monoszacharid egységekből állnak. A szövettani festéssel emberi és állati szövetmetszetekben azonosított fő poliszacharid a glikogén. Ez számos szövetben jelen van, többek között a vázizomban, a szívizomban, a májban és a vesében.
(2) Semleges nyálkaanyagok: Általában semleges nyálkaanyagok festésére és azonosítására is használják. Ezek közé tartozhatnak a glikoproteinek, glikolipidek és semleges mucinok, amelyeket a különböző szervek hámsejtjei termelnek.
(3) Szöveti bazálmembránok: Ezek a retikuláris kötőszövet PAS-pozitív vékony rétegei rögzítik és támasztják alá a hámot és az endothelt a mögöttes kötőszövethez.
(4) Gombás szervezetek: Egyes gombák sejtfalai nagy mennyiségű szénhidrátot tartalmaznak, és szintén PAS-pozitívan festődnek. Ez azonban csak élő gombákon működik.
A festés általános elvei
A PAS-technika reakcióképessége a monoszacharid egységek szerkezetén alapul.
A festés első reakciójában a periodikus sav oxidálószerként hatva oxidálja a két szomszédos hidroxilcsoport közötti szén-szén kötéseket. Ez Schiff-reaktív aldehidcsoportokat eredményez.
A második reakcióban a szövetszelvény reagál a Schiff-reagenssel. Ez bázikus fukszin, sósav és nátrium-metabiszulfit keverékéből áll. A keverékben lévő bázikus fukszin a szövetben újonnan képződött aldehidcsoportokkal reagálva élénk magenta színt hoz létre.
Végül, amikor a metszetet vízzel öblítjük, a szövetben lévő kötött fukszinmolekulák élénk magenta színt hoznak létre. A szín intenzitása arányos a monoszacharid egységekben eredetileg jelen lévő hidroxilcsoportok koncentrációjával.
A hematoxilint ezután általában ellenfestékként használják más szöveti elemek láthatóvá tételére. Ha azonban a PAS-t gombás szervezetek kimutatására használják, a világoszöld ellenfestést részesítik előnyben.
A glikogénraktározási betegségek diagnózisának segítésére a diasztáz (alfa-amiláz) emésztés is alkalmazható. A diasztáz hidrolizálja a keményítőt, a glikogént és az ezekből a szöveti poliszacharidokból származó bomlástermékeket. A glikogént tartalmazó szövetek tárgylemezével összehasonlítva a diasztáz extrakciós tárgylemezen nem lesz látható PAS-festés.
| Hisztológiai jellemző | Szín PAS-festéssel |
| Glikogén, bazálmembránok, nyálkaanyagok, gombák | Magenta |
| magok | kék (hematoxilin ellenfestéssel) |
| egyéb szöveti elemek | zöld (világoszöld ellenfestéssel) |
Ki használja a PAS festéket?
Ezt a festéket széles körben használják diagnosztikai és kutatási célokra egyaránt. Például a glikogénraktározási betegségeket vagy a bazálmembrán betegségeit tanulmányozó kutatók rutinszerűen vizsgálhatják a PAS-festett szöveti metszeteket, hogy értékeljék ezeket a megfelelő elemeket az érdeklődésre számot tartó szövetekben.
A diagnosztikai laboratóriumokban a patológusok gyakran használják ezt a festéket, hogy segítsen megválaszolni azokat a kérdéseket, amelyek a rutinszerű hematoxilin és eozin festett metszetek vizsgálata után merülnek fel. Különösen a következő betegségek diagnózisában segíthet:
- Glikogénraktározási betegségek: Ezek olyan állapotok, amelyekben túlzott mennyiségű glikogén raktározódik a májban, az izmokban vagy a vesében. A PAS-t a klinikumban gyakran rutinszerűen használják e szövetek biopsziáiban a glikogén felhalmozódásának kimutatására.
- Tumorok: A glikogénszemcsék jelen lehetnek egyes daganatokban is, beleértve néhányat azok közül, amelyek olyan szövetekben keletkeznek, mint a hasnyálmirigy, a tüdő és a húgyhólyag.
- Gombás fertőzés: A PAS használható egyes gombás szervezetek láthatóvá tételére szöveti metszetekben.
- Bázismembránok: Mivel a PAS a szövetek bazálmembránjainak kiemelésére használható, olyan rendellenességek azonosítására használható, amelyekben a bazálmembránok gyengesége vagy nem megfelelő működése áll fenn – mint például a vese egyes glomeruláris betegségei esetében.
Mire használják leggyakrabban a PAS-t az Ön laboratóriumában?
Segített ez Önnek? Akkor kérjük, ossza meg a hálózatával.