Bezpośrednie przeciwciało fluorescencyjne

Ten artykuł wymaga dodatkowych cytatów do weryfikacji. Prosimy o pomoc w ulepszeniu tego artykułu poprzez dodanie cytatów do wiarygodnych źródeł. Materiały niepochodzące z innych źródeł mogą zostać zakwestionowane i usunięte.
Znajdź źródła: „Direct fluorescent antibody” – news – newspapers – books – scholar – JSTOR (July 2009) (Learn how and when to remove this template message)

Bezpośrednie przeciwciało fluorescencyjne (DFA lub dFA), znane również jako „bezpośrednia immunofluorescencja”, to przeciwciało, które zostało oznaczone w teście bezpośredniego przeciwciała fluorescencyjnego. Jego nazwa pochodzi od faktu, że bezpośrednio bada obecność antygenu za pomocą znakowanego przeciwciała, w przeciwieństwie do Western Blotting, który wykorzystuje pośrednią metodę wykrywania, gdzie pierwotne przeciwciało wiąże docelowy antygen, z wtórnym przeciwciałem skierowanym przeciwko pierwotnemu i znacznikiem dołączonym do wtórnego przeciwciała.

Bezpośrednie FA barwione rozmazem wyciskowym mózgu myszy ujawnia obecność bakterii Chlamydia psittaci. 400X.

Dostępne są komercyjne zestawy do testowania DFA, które zawierają przeciwciała znakowane fluorescencyjnie, zaprojektowane tak, aby specyficznie celować w unikalne antygeny obecne w bakteriach lub wirusach, ale nieobecne u ssaków (Eukariota). Technika ta może być stosowana do szybkiego określenia, czy uczestnik ma określoną infekcję wirusową lub bakteryjną.

W przypadku wirusów oddechowych, z których wiele ma podobne szerokie objawy, wykrywanie może być przeprowadzone przy użyciu próbek popłuczyn nosowych od uczestnika z podejrzeniem infekcji. Chociaż można uzyskać komórki wydalające w drogach oddechowych, często są one w małych ilościach, a zatem można przyjąć alternatywną metodę, w której zgodna hodowla komórkowa może być poddana działaniu zakażonych próbek popłuczyn z nosa, więc jeżeli wirus jest obecny, można go wyhodować do większej ilości, co może następnie dać wyraźniejszy odczyt pozytywny lub negatywny.

Jak w przypadku wszystkich rodzajów mikroskopii fluorescencyjnej, należy określić prawidłową długość fali absorpcyjnej, aby wzbudzić znacznik fluoroforowy dołączony do przeciwciała i wykryć wydzielaną fluorescencję, która wskazuje, które komórki są pozytywne pod względem obecności wykrywanego wirusa lub bakterii.

Bezpośrednia immunofluorescencja może być stosowana do wykrywania złogów immunoglobulin i białek dopełniacza w biopsjach skóry, nerek i innych organów. Ich obecność wskazuje na chorobę autoimmunologiczną. Gdy badana jest skóra nie wystawiona na działanie promieni słonecznych, dodatni wynik bezpośredniego IF (tzw. Lupus band test) świadczy o toczniu rumieniowatym układowym. Bezpośrednie przeciwciała fluorescencyjne mogą być również stosowane do wykrywania infekcji pasożytniczych, co zostało zapoczątkowane przez Sadun, et al. (1960).

.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.