Obserwacja, że immunoneutralizacja somatostatyny zwiększyła podstawową objętość i produkcję amylazy w izolowanym modelu trzustki szczura, sugeruje wewnątrztrzustkowe źródło somatostatyny. Ta trzustkowa somatostatyna mogłaby zatem powodować toniczne hamowanie zewnątrzwydzielniczej sekrecji trzustki (97). U przytomnych szczurów, u których wydzieliny żółci i trzustki powracały do jelita, dożylna somatostatyna (5 µg kg-1 h-1) hamowała podstawowe trzustkowe wydzielanie białka i płynu odpowiednio o 84 i 64%; dodanie atropiny ip (500 µg kg-1 h-1) nie powodowało dalszego zahamowania (51). U znieczulonych szczurów podstawowe wydzielanie amylazy było istotnie hamowane przez wlew somatostatyny w stosunkowo wysokiej dawce 100 µg 100 g-1 h-1. Jednakże po podaniu w postaci bolusa 50 µg 100 g-1 BW, uwalnianie amylazy wzrastało czterokrotnie przez 20 min (39). W poprzednim badaniu (25), somatostatyna podawana w dawkach od 0,4 do 25 µg kg-1 h-1 przytomnym szczurom z przetoką powodowała zależne od dawki zmniejszenie przepływu podstawowego, uwalniania wodorowęglanów i białka. Przy najwyższych dawkach wyrzut białka był zmniejszony o 80%, wodorowęglanów o 63%, a przepływ o 42%. U szczurów znieczulonych uretanem, początkowy wzrost wszystkich parametrów trzustkowych obserwowano w ciągu pierwszych dwóch minut, po czym następował 30 do 40% spadek wydzielania białka. W takich warunkach somatostatyna musiała osiągnąć dawkę 100 µg kg-1 h-1, aby wpłynąć na podstawowe uwalnianie wodorowęglanów. Te dane dotyczące podstawowego trzustkowego wydzielania płynu i białek wskazują, że hamujący efekt somatostatyny wydaje się być specyficzny gatunkowo i wrażliwy na znieczulenie, jak wykazano wcześniej (17). Kiedy szczurom podawano domięśniowo SS-14 w dawkach od 12 do 96 µg kg-1 h-1, podstawowa całkowita objętość i wydzielanie białek nie uległy zmianie; wyniki te mogą wskazywać, że somatostatyna ze światła dwunastnicy nie wpływa na podstawowe wydzielanie trzustkowe bezpośrednio lub poprzez podstawowe uwalnianie CCK i sekretyny (126). W przeciwieństwie do szczura, dożylny wlew SS-28 w dawce 400 ng kg-1 h-1 całkowicie hamował podstawowe wydzielanie płynów i białek u przytomnego psa (147). Również u psów, u których wytworzono przetoki żołądkowo-trzustkowe, somatostatyna-14 w dawce 2,5 µg kg-1 h-1 hamowała podstawowe wydzielanie objętości i białka o ponad 90% (146).
U ludzi stymulacja trzustki przez dożołądkowe podanie tryptofanu lub mieszaniny aminokwasów była osłabiana przez egzogenną SS-28 (58). W innych badaniach u ludzi, oktreotyd hamował poposiłkowe wydzielanie enzymów trzustkowych (81). U psa, SS-14 podany w postaci dożylnego bolusa w dawce 3,5 µg kg-1, a następnie infuzji w dawce 3,5 µg kg-1 h-1 powodował znaczące zmniejszenie aktywności trypsyny i amylazy w dwunastnicy podczas stymulacji posiłkiem testowym (70). U szczura, oktreotyd znacząco hamował objętość trzustki, wodorowęglan, amylazę oraz stężenie sekretyny i CCK w surowicy w odpowiedzi na podawany domacicznie kwas oleinowy, uwalniacz CCK (137).
W zdrowych ochotnikach (30), czysty sok trzustkowy uzyskiwano przez endoskopowe kaniulowanie głównego przewodu trzustkowego. W odpowiedzi na syntetyczną sekretynę (0,06 j.m. kg-1 h-1), stężenie wodorowęglanów w soku trzustkowym osiągnęło poziom 117 µEq ml-1 po 10 min i przepływ soku 7,3 ml/5 min po 15 min infuzji sekretyny. SS-14 powodował zmniejszenie przepływu trzustkowego o 47% po 10 min i o 67% po 15 min. Stężenie wodorowęglanów i białek w soku trzustkowym wykazywało jedynie tendencję do zmniejszania się przy dawce somatostatyny wynoszącej 5 µg kg-1 h-1. Również u ludzi wydzielanie enzymów trzustkowych, ale nie wodorowęglanów, stymulowane przez sekretynę (250 ng kg-1/20 min) i ceruleinę (25 ng kg-1/20 min) było hamowane przez SMS 201-995 w sposób niezależny od dawki (73). U przytomnych psów (147) wydzielanie płynów i wodorowęglanów stymulowane przez sekretynę (1 j.m. kg-1 h-1) było nieznacznie hamowane przez większe dawki SS-28 (400 ng kg-1 h-1). W tej samej dawce wydzielanie białek stymulowane przez ceruleinę było istotnie hamowane. U znieczulonych szczurów liniowa somatostatyna-14 podawana w dawce 100 µg/100 g-1 h-1 powodowała silne zahamowanie wydzielania amylazy i trypsyny trzustkowej stymulowanego przez 3 jednostki IVY dog/100 g-1 h-1 CCK z szybkim odbiciem tych wydzielin po zakończeniu wlewu somatostatyny (39). U przytomnych szczurów z odprowadzeniem soku trzustkowego (51), które spowodowało silny wzrost wydzielania białka i płynu, wszystkie pięć dawek wlewanego oktreotydu (5,20,80,320 i 1280 ng kg-1 h-1) znacząco hamowało zarówno wydzielanie białka, jak i płynu, z IC50 wynoszącymi odpowiednio 40 i 60 ng kg-1 h-1. Maksymalna inhibicja wydzielania białek i płynów osiągnęła odpowiednio 90% i 75% przy dawce 1,28 µg kg-1 h-1. SS-14 w porównaniu ze swoim analogiem oktreotydem miał IC50 równe 0,7 µg kg-1 h-1 dla wydzielania białka i 1,2 µg kg-1 h-1 dla wydzielania płynu, przy czym maksymalny efekt hamujący uzyskano przy dawce 25 µg kg-1 h-1 zarówno dla wydzielania białka, jak i płynu. Dane te wskazują, że oktreotyd jest 20 razy silniejszy niż SS-14 w hamowaniu trzustkowego wydzielania białka i objętości stymulowanego przez wydzielanie soku trzustkowego.
Badania in vitro
Wydzielanie enzymów trzustkowych i płynów in vivo jest sumą wielu złożonych procesów fizjologicznych, które obejmują wzajemne oddziaływanie hormonów endokrynnych i parakrynnych, jak również stymulację i uwalnianie neuroprzekaźników. Ze względu na te liczne interakcje, często trudno jest ocenić, czy związek hamujący wydzielanie trzustkowe in vivo wpływa bezpośrednio na funkcje komórek akrynowych i przewodowych, czy też zmienia uwalnianie sekretagogów. Dlatego też izolowana perfundowana trzustka, izolowane preparaty komórek acinarnych i przewodowych oraz hodowle komórkowe obu typów komórek mogą dać odpowiedzi na niektóre z tych pytań.
Komórki acinarne trzustki szczura posiadają receptory specyficzne dla somatostatyny-14 i 28 (124,166), które pozostają obecne po przygotowaniu komórek (40). Stwierdzono również, że w izolowanej perfundowanej trzustce psa, gruczoł może pobierać do 50-80% somatostatyny perfundowanej w zakresie stężeń od 20 do 4000 pg ml-1 w porównaniu z mniej niż 21% insuliny lub glukagonu (71). Obserwacja ta została później potwierdzona ekstrakcją SS-14 przez trzustkę psa in situ, która wynosiła średnio ponad 50% w porównaniu z mniej niż 17% w przypadku glukagonu (152). Wszystkie te obserwacje pozwalają nam wierzyć, że somatostatyna powinna być w stanie bezpośrednio hamować stymulowane neuronalnie lub hormonalnie wydzielanie enzymów trzustkowych in vitro przy użyciu wyżej cytowanych preparatów komórkowych.
Pomimo wielu badań, hamujący wpływ SS-14 i SS-28 na stymulowane uwalnianie enzymów z izolowanych acini trzustkowych jest nadal kontrowersyjny. Aby zrozumieć niektóre z tych przeciwstawnych wyników, pomocne może być rozróżnienie pomiędzy wpływem SS na stymulację, gdzie agonista taki jak VIP działa poprzez cAMP, gdzie SS hamuje, a agonistami takimi jak CCK, gdzie niektórzy badacze obserwowali efekt hamujący, a inni nie. W perfundowanych żołądkach świnki morskiej profil kinetyczny uwalniania amylazy w odpowiedzi na VIP był znacząco zmniejszony przez SS (100 nM) (140). Z drugiej strony, oktreotyd (100 nM) znacząco hamował synergistyczne uwalnianie amylazy stymulowane przez sekretynę + CCK-8 lub przez VIP + CCK-8 (65). Somatostatyna hamowała również wpływ cAMP na indukowane wapniem wydzielanie amylazy z acini trzustki szczura, przesuwając krzywą dawka-odpowiedź w prawo (99), kolejny przykład SS działającego poprzez szlak cAMP.
Wiele innych badań jednak wyraźnie pokazuje, że somatostatyna nie ma hamującego wpływu na zewnątrzwydzielniczą trzustkę in vitro, czy to na izolowaną perfundowaną trzustkę, izolowane acini lub izolowane preparaty zrazików, w których CCK było bodźcem (65,96,99,139,158). W izolowanej trzustce szczura (43), egzogenna insulina (10 mU ml-1) znacząco nasilała wydzielanie CCK i amylazy stymulowane karbacholem, nasilenie to było znacząco hamowane przez SS. Brak bezpośredniego efektu hamującego SS zaobserwowano również w izolowanych komórkach ciemieniowych psów (106). Istotnie, SS w stężeniu 1 µM nie hamował odpowiedzi wydzielniczej żołądka na histaminę, metacholinę i pentagastrynę, co potwierdza niektóre z wyżej wymienionych danych. Co ciekawe, SS-28 w wysokim stężeniu 10 µM był w stanie stymulować uwalnianie amylazy z akinii trzustki świnki morskiej do około 68% uwalniania stymulowanego przez 100 pM kaeruleiny. Maksymalną odpowiedź sekrecyjną identyczną z tą inicjowaną przez ceruleinę uzyskano również w przypadku dwóch analogów SS-28, Nat S1-28 i SS28. W tych warunkach, SS-14 nie miał efektu stymulującego (33). Jako wyjaśnienie tego wydzielniczego efektu SS-28 na acini zaproponowano, że SS-28 może oddziaływać z receptorem CCK w wysokich stężeniach (34), efekt ten jest hamowany przez DBcGMP, antagonistę receptora CCK (105). Z drugiej strony, niepowodzenie SS-14 w hamowaniu stymulowanego wydzielania enzymów z izolowanych acinii może wynikać z uwolnienia do medium inkubacyjnego aktywnej proteazy, po raz pierwszy zaobserwowanej w wydzielanym soku trzustkowym i zdolnej do degradacji SS-14 (127). Ta proteaza serynowa została oczyszczona do jednorodności z czystego soku trzustkowego szczura. Z MW około 29 kDa, odpowiada ona elastazie II szczurzej trzustki. Dlatego, gdyby została wydzielona do medium inkubacyjnego, zdegradowałaby SS-14 i uniemożliwiłaby jakiekolwiek jej działanie hamujące, co częściowo wyjaśnia, dlaczego SS-14 nie była w stanie wykazać działania hamującego na uwalnianie enzymu in vitro (151). Może to również wpływać na odpowiedź sekrecyjną na SS-28 w niższych stężeniach w medium inkubacyjnym. Inną możliwością może być to, że środki mobilizujące wapń komórkowy zmniejszają powinowactwo receptorów somatostatynowych komórek akinarnych do somatostatyny (33).
Wpływ na wzrost
Normalny wzrost organizmu wynika ze złożonej równowagi zaangażowanych hormonów, takich jak hormon wzrostu, insulina i hormony tarczycy. Ponieważ somatostatyna może hamować uwalnianie wielu hormonów, jej neutralizacja powinna stymulować ich wydzielanie, a tym samym zwiększać wzrost. To podejście polegające na autoimmunizacji przeciwko somatostatynie w celu stymulacji wzrostu zostało przetestowane na jagniętach. W przypadku uzyskania znaczących mian przeciwciał, tempo przyrostu masy ciała było większe u zwierząt immunizowanych SS i towarzyszyło mu zwiększenie wzrostu. U tych immunizowanych jagniąt występowała większa odpowiedź hormonu wzrostu na stymulację argininą, jak również podstawowy wyższy poziom somatomedyny we krwi (143). Dane te zostały później potwierdzone również u tego gatunku (75). Podawana szczurom implantowanym podskórnie za pomocą minipompy Alzet, somatostatyna dostarczana w dawce 1,5 µg h-1 przez 14 dni nie miała wpływu na ich przyrost masy ciała. Jednakże infuzja antagonisty somatostatyny prowadziła do znacznego zwiększenia przyrostu masy ciała w stosunku do kontroli (144).
Na szczurach codzienne wstrzykiwanie somatostatyny-14 w dawce 390 µg kg-1 dzień-1 w żelatynie przez trzy tygodnie nie miało wpływu na masę ciała, ale obniżyło gęstość komórek ciemieniowych i wrzodowych na milimetr sześcienny w porównaniu do kontroli. Jednakże, antagonizowała efekt promujący wzrost egzogennego (130 µg kg-1 dzień-1) i endogennego uwalniania gastryny po transpozycji antrum na okrężnicę, powodując hipergastrynemię. U tych zwierząt po transpozycji antrum, zwiększona masa trzustki była znacząco zredukowana przez somatostatynę (400 µg kg-1 dzień-1) przez 3 tygodnie (80). Przez okres 5 dni somatostatyna-14 s.c. w żelatynie w dawkach 11, 33 lub 100 µg kg-1 co 8 h powodowała istotne obniżenie stężenia amylazy trzustkowej, chymotrypsyny i białka oraz całkowitej zawartości DNA tylko w dwóch najwyższych dawkach, bez wpływu na całkowitą masę trzustki. Jednakże tempo syntezy białka, RNA i DNA było znacznie zmniejszone bezpośrednio po każdym wstrzyknięciu somatostatyny w ciągu 24 h (92). Somatostatyna-14, również podawana s.c. w żelatynie w dawce 600 µg kg-1, trzy razy dziennie przez 2 i 4 dni, znacząco zmniejszała troficzne działanie ceruleiny (1 µg kg-1, trzy razy dziennie) z silnym wpływem na całkowitą zawartość DNA. Co ciekawe, immunoneutralizacja przeciwko SS-14 znacząco zwiększyła wszystkie badane parametry wzrostu ponad te obserwowane w odpowiedzi na działanie ceruleiny (93). Podobne efekty hamujące obserwowano przy długotrwałym podawaniu długo działającej somatostatyny, SMS 201-995 (54). Przekierowanie soku trzustkowego u szczura powoduje znaczne uwolnienie endogennej CCK, co skutkuje zwiększonym wzrostem trzustki (89). Wykorzystując tę procedurę przekierowania soku żółciowo-trzustkowego, taka technika stosowana 8 h dziennie-1 przez 4 dni prowadziła do znaczącego wzrostu masy trzustki i stężenia CCK w surowicy; oba efekty były znacząco zredukowane przez SMS 201-995 podawany w dawce 5 µg kg-1 h-1 i przez L-364,718, antagonistę receptora CCK-1, podawanego w dawce 0,5 mg kg-1 h-1. W tych warunkach, zarówno SMS jak i L-364,718 były equipotentne w zmniejszaniu wzrostu trzustki, podczas gdy SMS był jedynym antagonistą zdolnym do zmniejszenia do poziomu podstawowego endogennej CCK uwalnianej przez przekierowanie trzustkowo-pęcherzykowe (119). Dane te wskazują, że somatostatyna i jej analogi mogą zmniejszać rozrost trzustki stymulowany egzogenną i endogennie uwolnioną CCK. Wreszcie, zaobserwowano, że somatostatyna (SMS) podawana w dawce 5 µg kg-1 h-1 przez 2 dni była w stanie całkowicie zapobiec indukowanemu przez 70% kazeinę wzrostowi masy trzustki oraz całkowitej zawartości RNA i DNA (94). Jest to kolejny dowód na to, że somatostatyna może kontrolować indukowany wzrost trzustki stymulowany przez endogenną CCK uwalnianą przez dietę bogatą w białka (50). SMS 201-995 podawany samodzielnie jako wlew dożylny przez 7 dni w dawce 5 µg kg-1 h-1 powodował znaczące zmniejszenie masy trzustki i jelit, czemu towarzyszyło zmniejszenie całkowitej ilości DNA i RNA w obu narządach. CCK i IGF-1 w osoczu były zmniejszone, podczas gdy całkowita zawartość IGF-1 w trzustce była zwiększona (120). Oprócz endogennej CCK, niektóre obserwacje sugerują możliwy udział IGF-1 w procesie pozytywnej kontroli wzrostu w jelicie i trzustce. Rzeczywiście, ten czynnik wzrostu jest obecny w jelicie (28) i trzustce (56), a specyficzne receptory zostały udokumentowane na komórkach tych narządów (76,162); postulowano parakrynne lub autokrynne mechanizmy działania (29). Somatostatyna może działać na kontrolę tych dwóch narządów poprzez hamowanie uwalniania IGF-1, któremu towarzyszy podobny wpływ na jelitową CCK.
Wpływ somatostatyny na guzy trzustki
Somatostatyna została scharakteryzowana jako „uniwersalny wyłącznik”, ponieważ hamuje większość funkcji narządowych i komórkowych, z którymi jest związana. Rola somatostatyny i jej analogów w leczeniu raka trzustki została zasugerowana, ponieważ cząsteczki te początkowo zapewniały pozytywną nietoksyczną terapię adjuwantową.
W chomiku syryjskim Golden, któremu wszczepiono podskórnie komórki gruczolakoraka przewodowego trzustki WD, 21-dniowe przewlekłe leczenie analogiem somatostatyny (L-5-Br-Trp8)SS w dawce 20 µg p.o., zmniejszyło masę guza o 44%, a objętość guza o 22% (114). Wykazano również, że somatostatyna i jej analog RC-160 hamują zmiany przednowotworowe i zmniejszają częstość występowania guzów u chomików narażonych na działanie rakotwórczego czynnika trzustkowego BOP; zabiegi te powodowały wzrost liczby apoptotycznych komórek nowotworowych (150). W innym badaniu, liczba receptorów somatostatynowych wzrosła na komórkach guza po leczeniu RC-160 (35). Wzrost komórek MIAPaCa-2 wszczepionych s.c. myszom nagim był hamowany w sposób zależny od dawki przez dwukrotne codzienne iniekcje oktreotydu w dawce 250 i 2500 µg kg-1 (160). Stosując inny sposób podawania leku, mikrokapsułki, RC-160 podawany w dawce 1250 µg kg-1 d-1 znacząco hamował wzrost guzów MIAPaCa-2 u myszy nagich (110). Niepowodzenie somatostatyny lub jej analogów w hamowaniu wzrostu guza mogło wynikać z braku receptora SS, jak wykazano w ludzkich komórkach raka trzustki PGER, które nie reagują na SMS 201-995 (141). W komórkach MIAPaCa-2 i PANC-1 hodowanych w DMEM zawierającym 10% płodowej surowicy cielęcej, 1 µM SS-14 i SMS 201-995 hamowały wzrost komórek PANC-1 z aktywacją fosfatazy tyrozynowej SHP-1. Przeciwnie, SS i jego analog powodowały wzrost komórek MIAPaCa-2, a ten efekt wzrostowy mógł wynikać z braku SHP-1 w tych komórkach (31). W komórkach reagujących na somatostatynę, wykazano wcześniej, że SHP-1 współwystępuje z receptorem somatostatyny (167). Podobny efekt stymulujący wzrost SMS obserwowano w komórkach BON (ludzkich komórkach raka trzustki) w dawce 1 nM i 100 nM; temu efektowi wzrostowemu towarzyszyło znaczne zmniejszenie zawartości cAMP w komórkach bez wpływu na hydrolizę PI (66).
Większość badań klinicznych analogów somatostatyny w adiuwantowym leczeniu raka trzustki nie wykazała odpowiedzi. U 14 chorych na przerzutowego raka trzustki nie obserwowano efektu przeciwnowotworowego po podaniu trzech codziennych s.c. wstrzyknięć 100-200 µg SMS przez 7 tygodni (72). W innym badaniu dziewiętnastu chorych na zaawansowanego egzokrynnego raka trzustki otrzymywało analog somatostatyny BIM23014 w dawce od 250 µg do 1 mg dziennie-1 przez 2 miesiące. W tej grupie u jednego chorego uzyskano częściową odpowiedź, u 6 choroba była stabilna, a u jedenastu nastąpiła progresja choroby (20). Z badań przeprowadzonych na różnych komórkach raka trzustki i uzyskanych różnych odpowiedzi na ich wzrost wynika, że jednym z kluczy do sukcesu w krytycznej walce z rakiem trzustki jest ekspresja specyficznych receptorów somatostatynowych i zastosowanie specyficznego analogu (37). Właściwości pięciu sklonowanych podtypów ludzkich receptorów somatostatyny oraz ustalone, prawdopodobne i nieustalone wskazania do stosowania analogów somatostatyny zostały podsumowane w odnośniku 77.
Kliniczne zastosowanie somatostatyny
Klinicznie, oktreotyd był stosowany w leczeniu ostrego zapalenia trzustki, ale nie potwierdzono jednomyślnych korzyści. W jednym z badań (111) somatostatyna była podawana w początkowej dawce 250 µg w bolusie, a następnie 250 µg h-1 we wlewie ciągłym; leczenie u 9 z 12 pacjentów z ostrym zapaleniem trzustki odwróciło amylazemię i przyniosło poprawę kliniczną, ale nie wykazało zmniejszenia śmiertelności. Somatostatyna pozostaje jednak skuteczną metodą leczenia utrwalonych miejscowych powikłań ostrego zapalenia trzustki, takich jak przetoki trzustkowe i pseudocysty (112). W jednym z badań pacjenci z przerzutowymi guzami endokrynnymi trzustki byli leczeni początkowo oktreotydem w dawce 50 µg s.c. co 12 h, a następnie (6-16 miesięcy) dawkę zwiększono do 500 µg co 8 h. Niektórzy pacjenci nie odpowiadali na leczenie, podczas gdy u innych było ono skuteczne; objawy ulegały poprawie, ale w końcu nawracały i wszyscy pacjenci zmarli po osiągnięciu fazy oporności choroby (163). Dane te wskazują, że somatostatyna nie jest idealnym lekiem w leczeniu zapalenia trzustki, ale może być przydatna w leczeniu miejscowych powikłań choroby. Wykazano natomiast, że SMS bardzo skutecznie eliminuje biegunkę trzustkową i pozwala na wyrównanie odwodnienia i kwasicy. Jego efektem było znaczne zmniejszenie stężenia VIP w osoczu (84).
3. Narzędzia do badania somatostatyny
a) Peptyd
Somatostatyna-14 i -28 są dostępne komercyjnie. Głównym agonistą stosowanym in vivo jest oktreotyd (SMS 201-995), a pozostałe to: RC-160, BIM-23014, BIM-23056, BIM-23027 i L-362,855. Spośród serii BIM, BIM-23056 działa zarówno jako agonista na receptor SST-3, jak i antagonista na receptor SST-5 (161). Struktury chemiczne tych cząsteczek przedstawiono w tabeli 1.
b) Przeciwciała i oznaczenia
Przeciwciała przeciwko somatostatynie -14, -28, SMS 201-995 i RC-160 zostały opracowane w wielu laboratoriach. Jako przykład, Guillemin stworzył RIA z wykorzystaniem owczej surowicy BARBAR-78; ta surowica została wyhodowana przeciwko syntetycznej SS-14 i reaguje krzyżowo z syntetyczną owczą SS-28 w stosunku równomolowym (15). Opracowano również specyficzną surowicę przeciwko SS-28 (67) i ustalono również RIA dla SMS 201-995 (5) i RC-160 (83).
c) Modele doświadczalne
Większość badań fizjologicznych przeprowadzonych na ludziach przeprowadzono na zdrowych ochotnikach płci męskiej i żeńskiej (30). Wśród zwierząt doświadczalnych, badania przeprowadzono głównie u przytomnych psów z przetoką żołądkową i trzustkową (146,147), u przytomnych szczurów z odprowadzeniem soku żółciowo-trzustkowego (25,127) i u znieczulonych szczurów (39). W celu określenia przewlekłego wpływu somatostatyny na trzustkę, szczury poddawano codziennym wstrzyknięciom s.c. somatostatyny (92). Badania in vitro przeprowadzano zwykle z użyciem świeżo przygotowanych acinii trzustkowych, izolowanych zrazików lub izolowanej perfundowanej trzustki szczura, myszy lub świnki morskiej (65, 96,139,158). W tabeli 2 przedstawiono niektóre dane dotyczące stosowanych gatunków zwierząt, dawek lub stężeń somatostatyny i podawanych analogów oraz efektów ich działania.
.