Promotory/Katalog/T7

Opis

Promotory T7 mogą wytwarzać wysoki poziom transkrypcji w E. coli, gdy obecna jest T7 RNAP. Drugą zaletą promotorów T7 jest to, że nie są one rozpoznawane przez RNAP E. coli, co czyni promotory T7 zdolnymi do niezależnej regulacji od promotorów E. coli. Ponieważ aktywny, silny promotor T7 może całkowicie zatrzymać wzrost E. coli z powodu wysokiego poziomu zużycia zasobów (np. nukleotydów) przez T7 RNAP, zwykle konieczne jest regulowanie poziomu albo T7 RNAP, albo promotora T7, albo obu. Rodzina promotorów T7 zawiera zarówno promotory konstytutywne, jak i negatywnie regulowane promotory, które mogą być wyłączone przez białko represorowe. Najbardziej powszechnym szczepem komórkowym używanym z systemem promotora T7 jest BL21(DE3), który jest szczepem E. coli B zawierającym lizogen λ z indukowalnym genem T7 RNAP na chromosomie. Jednakże, możliwe jest zaprojektowanie wielu innych szczepów E. coli do warunkowej ekspresji T7 RNAP.

Otrzymywanie kolekcji promotorów T7

Sekwencje promotorów T7 można znaleźć w poniższej tabeli. Aby uzyskać fizyczne DNA, zalecamy dwa podejścia –
Via synteza de novo: Ponieważ promotory są stosunkowo krótkimi sekwencjami, można je zamówić jako dwa jednoniciowe nakładające się oligo są annealowane i przedłużane w celu skonstruowania pełnych promotorów. Zobacz ten protokół OpenWetWare, jak konstruować części przez annealowanie i przedłużanie oligo. Alternatywnie promotory można zamówić jako krótkie geny z firmy takiej jak Geneart.

Przez dystrybucję Registry: Niektóre z promotorów są dostępne w bieżącej dystrybucji rejestru, patrz kolumna dostępność w poniższej tabeli.

Projektowanie & Konstruowanie

Promotory T7 w kolekcji zostały zaprojektowane i skonstruowane przez kilka różnych grup. Jednakże istnieje tylko T7 RNAP, a więc tylko jeden rodzaj promotora T7. Sekwencja konsensusu dla promotorów T7 może być wywnioskowana z logo sekwencji dla promotorów T7 pokazanych po prawej stronie.

Kolekcja promotorów T7

.

.

.

.

.

.

.

Więcej…

Name	Description	Promoter Sequence	Positive Regulators	Negative Regulators	Długość	Doc	Status
BBa_I712074	Promotor T7 (silny promotor z bakteriofaga T7)	. . . agggaatacaagctacttgttctttgca			46	1938	In stock
BBa_I719005	T7 Promotor	taatacgactcactatagggaga			23	7912	Na stanie
BBa_J34814	T7 Promotor	gaatttaatacgactcactatagggaga				28	1190	Not in stock
BBa_J64997	T7 consensus -.10 i reszta	taatacgactcactatagg			19	10154	To skomplikowane
BBa_K113010	nakładający się promotor T7	. . gagtcgtattaatacgactcactatagggg			40	1553	To skomplikowane
BBa_K113011	bardziej nakładający się promotor T7	. . agtgagtcgtactacgactcactatagggg			37	1601	To skomplikowane
BBa_K113012	osłabiony nakładający się promotor T7	. gagtcgtattaatacgactctctatagggg			40	1630	To skomplikowane
BBa_K1614000	Promotor T7 dla ekspresji funkcjonalnego RNA	taatacgactcactatag			18	5219	In stock
BBa_K3511008	C62-.Promotor T7	taatacgactcacaatcgcggag			23
BBa_K3633015	Promotor T7	taatacgactcactatagg			19		To skomplikowane
BBa_K525998	Promotor T7 i RBS	. . . atacgactcactatagggaaaggagaaa			32	3036	W magazynie
BBa_R0085	Sekwencja promotorowa konsensusu T7	taatacgactcactatagggaga			23	2072	In stock
BBa_R0180	Promotor T7 RNAP	ttatacgactcactatagggaga			23	1654	Not in stock
BBa_R0181	T7 RNAP promotor	gaatacgactcactatagggaga			23	1651	Brak w magazynie
BBa_R0182	T7 RNAP promotor	taatacgtctcactatagggaga			23	1653	Nie występuje w magazynie
BBa_R0183	Promotor T7 RNAP	tcatacgactcactatagggaga				23	1653	Not in stock
BBa_R0184	Promotor T7 (lacI repressible)	. . ataggggaattgtgagcggataacaattcc			44	1176	Not in stock
BBa_R0185	T7 promotor (lacI repressible)	. . ataggggaattgtgagcggataacaattcc			44	1888	Not in stock
BBa_R0186	T7 promotor (lacI repressible)	. ataggggaattgtgagcgataacaattcc			44	1885	Not in stock
BBa_R0187	T7 promotor (lacI repressible)	. . ataggggaattgtgagcgataacaattcc			44	1885	Not in stock
BBa_Z0251	T7 strong promotor	. . taatacgactcactataggagaccacaac			35	1887	Not in stock
BBa_Z0252	T7 weak binding and processivity	. taattgaactcactaaaggagcaccacagc		35	1667	Not in stock
BBa_Z0253	T7 słabe wiązanie promotora	. . cgaagtaatacgactcactattagggaaga			35	1400	Brak w magazynie

.