Acidul periodic-Schiff (PAS) este un alt colorant special utilizat în mod obișnuit în laboratorul de histologie.
Ce colorează PAS?
(1) Polizaharide: Tehnica este folosită în mod obișnuit pentru a identifica polizaharidele- aceste macromolecule sunt compuse din unități de monosacaride unite prin legături covalente. Principala polizaharidă identificată prin colorație histologică în secțiunile de țesut uman și animal este glicogenul. Acesta este prezent în numeroase țesuturi, inclusiv în mușchiul scheletic, mușchiul cardiac, ficat și rinichi.
(2) Substanțe neutre din mucus: Este, de asemenea, utilizat în mod obișnuit pentru a colora și identifica substanțele neutre din mucus. Acestea pot include glicoproteine, glicolipide și mucine neutre, care sunt produse de celulele epiteliale din diferite organe.
(3) Membrane bazale tisulare: Aceste straturi subțiri PAS-pozitive de țesut conjunctiv reticular ancorează și susțin epiteliul și endoteliul de țesutul conjunctiv subiacent.
(4) Organisme fungice: Pereții celulari ai unor organisme fungice conțin niveluri ridicate de carbohidrați și, de asemenea, se colorează PAS-pozitiv. Cu toate acestea, acest lucru funcționează numai pe ciuperci vii.
Principiile generale ale colorației
Reactivitatea tehnicii PAS se bazează pe structura unităților de monosacaride.
Prima reacție din cadrul colorației implică acidul periodic care acționează ca agent oxidant pentru a oxida legăturile de carbon la carbon dintre două grupări hidroxil adiacente. Aceasta produce grupări aldehidice reactive Schiff.
În a doua reacție, secțiunea de țesut reacționează cu reactivul Schiff. Acesta cuprinde un amestec de fucsină bazică, acid clorhidric și metabisulfit de sodiu. Fuchsina bazică din amestec reacționează cu grupările aldehidă nou formate în țesut pentru a produce o culoare magenta strălucitoare.
În cele din urmă, când secțiunea este clătită în apă, moleculele de fuchsină legate în țesut produc apoi o culoare magenta strălucitoare. Intensitatea culorii este proporțională cu concentrația de grupe hidroxil prezente inițial în unitățile de monosaharide.
Haematoxilina este apoi utilizată de obicei ca o contracolorație pentru a vizualiza alte elemente tisulare. Cu toate acestea, atunci când se utilizează PAS pentru a demonstra prezența organismelor fungice, se preferă o contracolorație verde deschis.
Digestia cu diastază (alfa-amilază) poate fi, de asemenea, utilizată pentru a ajuta la diagnosticarea bolilor de stocare a glicogenului. Diastaza hidrolizează amidonul, glicogenul și produsele de degradare provenite din aceste polizaharide tisulare. În comparație cu o lamelă de țesut care conține glicogen, o lamelă de extracție cu diastază nu va avea nicio colorație PAS vizibilă.
| Caracteristică histologică | Culoare cu colorație PAS |
| Glicogen, membrane bazale, substanțe mucoase, organisme fungice | Magenta |
| Nuclee | Albastru (cu contracolorație cu hematoxilină) |
| Alte elemente tisulare | Verde (cu contracolorație verde deschis) |
Cine folosește colorația PAS?
Acest colorant este utilizat pe scară largă atât în scopuri de diagnostic cât și de cercetare. De exemplu, cercetătorii care studiază bolile de stocare a glicogenului sau bolile membranei bazale pot examina în mod obișnuit secțiuni de țesut colorate cu PAS pentru a evalua aceste elemente respective în țesuturile de interes.
În laboratoarele de diagnostic, patologii folosesc adesea această colorație pentru a răspunde la întrebările care pot apărea după examinarea secțiunilor de rutină colorate cu hematoxilină și eozină. În special, poate fi folosită pentru a ajuta la diagnosticarea:
- Boli de stocare a glicogenului: Acestea sunt afecțiuni în care cantități excesive de glicogen sunt stocate în ficat, mușchi sau rinichi. PAS este adesea utilizat de rutină în clinică pentru a demonstra acumularea de glicogen în biopsii ale acestor țesuturi.
- Tumori: Granulele de glicogen pot fi, de asemenea, prezente în unele tumori, inclusiv unele dintre cele care apar în țesuturi precum pancreasul, plămânul și vezica urinară.
- Infecție fungică: PAS poate fi folosit pentru a vizualiza unele organisme fungice în secțiuni de țesut.
- Membrane bazice: Deoarece PAS poate fi folosit pentru a evidenția membranele bazale ale țesuturilor, poate fi folosit pentru a identifica afecțiuni în care există o slăbiciune sau o funcționare necorespunzătoare a membranelor bazale – cum ar fi în cazul unor boli glomerulare la nivelul rinichilor.
Pentru ce se folosește cel mai frecvent PAS în laboratorul dumneavoastră?
V-a ajutat acest lucru? Atunci vă rugăm să împărtășiți cu rețeaua dumneavoastră.