Promotoare/Catalog/T7

Descriere

Promotoarele T7 pot produce niveluri ridicate de transcripție în E. coli atunci când este prezentă RNAP T7. Al doilea avantaj al promotorilor T7 este că nu sunt recunoscuți de RNAP E. coli, ceea ce face ca promotorii T7 să fie capabili de o reglare independentă față de promotorii E. coli. Având în vedere că un promotor T7 activ și puternic poate opri complet creșterea E. coli din cauza nivelului ridicat de consum de resurse (de exemplu, nucleotide) de către T7 RNAP, este necesar, de obicei, să se regleze nivelurile fie ale T7 RNAP, fie ale promotorului T7, fie ale ambelor. Ca atare, familia de promotori T7 conține atât promotori constitutivi, cât și promotori reglați negativ, care pot fi dezactivați de o proteină represoare. Cea mai frecventă tulpină celulară care se utilizează cu un sistem de promotori T7 este BL21(DE3), care este o tulpină B de E. coli care conține un lizogen λ cu o genă T7 RNAP inductibilă pe cromozom. Cu toate acestea, este posibil să se creeze multe alte tulpini de E. coli pentru a exprima condiționat T7 RNAP.

Obținerea colecției de promotori T7

Secvențele promotorilor T7 pot fi găsite în tabelul de mai jos. Pentru a obține ADN-ul fizic, se recomandă două abordări –
Via sinteză de novo: Deoarece promotorii sunt secvențe relativ scurte, acestea pot fi comandate sub forma a două oligoane monocatenare suprapuse care sunt aneantizate și extinse pentru a construi promotorii compleți. A se vedea acest protocol OpenWetWare cu privire la modul de construire a părților prin aneantizarea și extinderea oligo. Alternativ, promotorii pot fi comandați sub formă de gene scurte de la o companie precum Geneart.

Via Registry distribution: Unii dintre promotori sunt disponibili în distribuția actuală a registrului, a se vedea coloana de disponibilitate din tabelul de mai jos.

Design &Construcție

Promotoarele T7 din colecție au fost proiectate și construite de mai multe grupuri diferite. Cu toate acestea, există doar T7 RNAP și, prin urmare, doar un singur tip de promotor T7. Secvența consensuală pentru promotorii T7 poate fi dedusă din logo-ul secvenței pentru promotorii T7 prezentat în dreapta.

Colecția de promotori T7

.

.

.

.

.

.

>.

.

.

Mai mult…

Nume	Descriere	Secvența promotorului	Regulatori pozitivi Regulatori	Regulatori negativi Regulatori	Negativi Regulatori	Lungime	Doc	Status
BBa_I712074	Promoter T7 (promotor puternic din bacteriofagul T7)	. . . agggaatacaagctactcttgttctttttgca			46	1938	În stoc
BBa_I719005	Promoter T7	taatacgactcactatagggaga				23	7912	În stoc
BBa_J34814	Promoter T7	gaatttaataatacgactcactatagggaga			28	1190	Nu este în stoc
BBa_J64997	T7 consensus -10 și restul		taatacgactcactatagg			19	10154	Este complicat
BBa_K113010	Suprapunerea promotorului T7	. . gagtcgtattataatacgactcactatagggg			40	1553	Este complicat
BBa_K113011	mai mult promotor T7 suprapus	. . agtgagtcggtactactacgactcactatagggg			37	1601	Este complicat
BBa_K113012	Mai slabă suprapunere a promotorului T7	. . gagtcggtattaatacgactctctctatagggg			40	1630	Este complicat
BBa_K1614000	Promoterul T7 pentru exprimarea ARN-ului funcțional	taatacgactcactatag			18	5219	În stoc
BBa_K3511008	C62-T7 promoter	taatacgactcacaatcgcggag			23
BBa_K3633015	T7 promoter	taatacgactcactatagg			19			Este complicat
BBa_K525998	Promoter T7 și RBS	. . . atacgactcactatagtagggaaagaggagaaa			32	3036	În stoc
BBa_R0085	T7 Consensus Promoter Sequence	taatacgactcactatagggaga				23	2072	În stoc
BBa_R0180	T7 RNAP promoter	ttatacgactcactatagtagggaga			23	1654	Nu este în stoc
BBa_R0181	T7 RNAP promoter	gaatacgactcactatagtagggaga			23	1651	Nu este în stoc
BBa_R0182	T7 RNAP promoter	taatacgtctcactatagggaga				23	1653	Nu este în stoc în stoc
BBa_R0183	T7 RNAP promoter	tcatacgactcactatagggaga				23	1653	Nu este în stoc
BBa_R0184	Promoter T7 (reprimabil lacI)	. . ataggggaattgtggagcggataacaattcc			44	1176	Nu este în stoc
BBa_R0185	Promoterul T7 (reprimabil lacI)	. . ataggggaattgtggagcggataacaattcc			44	1888	Nu este în stoc
BBa_R0186	Promoterul T7 (reprimabil lacI)	. . . . . ataggggaattgtgtgagcggataacaattcc			44	1885	Nu este în stoc
BBa_R0187	Promoterul T7 (reprimabil lacI)	. . ataggggaattgtggagcggataacaattcc			44	1885	Nu este în stoc
BBa_Z0251	Promoter T7 puternic	. . taatacgactcactatagtagggagaccacaac			35	1887	Nu este în stoc
BBa_Z0252	T7 legare slabă și procesivitate slabă	. . . . . taattgaactcacactaaagggagaccacagc			35	1667	Nu este în stoc
BBa_Z0253	T7 promotor de legare slabă	. . cgaagtaatacgactcactattagggaaga			35	1400	Nu este în stoc

.