Find kilder: “Direkte fluorescerende antistof” – nyheder – aviser – bøger – scholar – JSTOR (juli 2009) (Lær hvordan og hvornår du kan fjerne denne skabelonbesked)
Et direkte fluorescerende antistof (DFA eller dFA), også kendt som “direkte immunofluorescens”, er et antistof, der er blevet mærket i en test med direkte fluorescerende antistoffer. Navnet stammer fra det faktum, at det direkte tester tilstedeværelsen af et antigen med det mærkede antistof, i modsætning til western blotting, som anvender en indirekte påvisningsmetode, hvor det primære antistof binder målantigenet, med et sekundært antistof rettet mod det primære, og et tag, der er knyttet til det sekundære antistof.
Der findes kommercielle DFA-testsæt, som indeholder fluorescerende mærkede antistoffer, der er designet til specifikt at ramme unikke antigener, der findes i bakterier eller virus, men som ikke findes i pattedyr (eukaryoter). Denne teknik kan anvendes til hurtigt at fastslå, om en person har en specifik virus- eller bakterieinfektion.
Med hensyn til respiratoriske virus, hvoraf mange har lignende brede symptomer, kan påvisning foretages ved hjælp af prøver fra næseskylning fra den person, der mistænkes for at have en infektion. Selv om der kan opnås udskillende celler i luftvejene, er det ofte i lavt antal, og derfor kan der anvendes en alternativ metode, hvor kompatible cellekulturer kan udsættes for inficerede nasale vaskeprøver, så hvis viruset er til stede, kan det dyrkes op til en større mængde, som så kan give en klarere positiv eller negativ måling.
Som ved alle typer fluorescensmikroskopi skal den korrekte absorptionsbølgelængde bestemmes for at kunne excitere det fluorophore tag, der er knyttet til antistoffet, og detektere den afgivne fluorescens, som angiver, hvilke celler der er positive for tilstedeværelsen af den virus eller bakterie, der påvises.
Direkte immunofluorescens kan anvendes til at påvise aflejringer af immunoglobuliner og komplementproteiner i biopsier af hud, nyrer og andre organer. Deres tilstedeværelse er et tegn på en autoimmun sygdom. Når hud, der ikke er udsat for solen, testes, er en positiv direkte IF (den såkaldte Lupus band test) et bevis på systemisk lupus erythematosus. Direkte fluorescerende antistoffer kan også anvendes til påvisning af parasitinfektioner, hvilket Sadun et al. (1960) var banebrydende med.