L’acide périodique-Schiff (PAS) est une autre coloration spéciale couramment utilisée dans le laboratoire d’histologie.
Qu’est-ce que le PAS colore ?
(1) Polysaccharides : Cette technique est couramment utilisée pour identifier les polysaccharides- ces macromolécules sont composées d’unités monosaccharidiques reliées par des liaisons covalentes. Le principal polysaccharide identifié par coloration histologique dans les coupes de tissus humains et animaux est le glycogène. Celui-ci est présent dans de nombreux tissus, notamment les muscles squelettiques, les muscles cardiaques, le foie et les reins.
(2) Substances muqueuses neutres : Il est également couramment utilisé pour colorer et identifier les substances neutres du mucus. Celles-ci peuvent inclure des glycoprotéines, des glycolipides et des mucines neutres, qui sont produites par les cellules épithéliales de différents organes.
(3) Membranes basales des tissus : Ces fines couches PAS-positives de tissu conjonctif réticulaire ancrent et soutiennent l’épithélium et l’endothélium au tissu conjonctif sous-jacent.
(4) Organismes fongiques : Les parois cellulaires de certains organismes fongiques contiennent des niveaux élevés d’hydrates de carbone et présentent également une coloration PAS-positive. Cependant, cela ne fonctionne que sur les champignons vivants.
Principes généraux de la coloration
La réactivité de la technique PAS est basée sur la structure des unités monosaccharides.
La première réaction de la coloration implique un acide périodique agissant comme un agent oxydant pour oxyder les liaisons carbone-carbone entre deux groupes hydroxyles adjacents. Cela produit des groupes aldéhyde réactifs de Schiff.
Dans la deuxième réaction, la section de tissu réagit avec le réactif de Schiff. Celui-ci comprend un mélange de fuchsine basique, d’acide chlorhydrique et de métabisulfite de sodium. La fuchsine basique du mélange réagit avec les groupes aldéhydes nouvellement formés dans le tissu pour produire une couleur magenta brillante.
Enfin, lorsque la section est rincée à l’eau, les molécules de fuchsine liées dans le tissu produisent alors une couleur magenta brillante. L’intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration de groupes hydroxyles présents à l’origine dans les unités monosaccharides.
L’hématoxyline est ensuite typiquement utilisée comme contre-coloration pour visualiser d’autres éléments tissulaires. Lorsque le PAS est utilisé pour mettre en évidence des organismes fongiques, cependant, une contre-coloration vert clair est préférable.
La digestion par diastase (alpha-amylase) peut également être utilisée pour aider au diagnostic des maladies de stockage du glycogène. La diastase hydrolyse l’amidon, le glycogène et les produits de dégradation provenant de ces polysaccharides tissulaires. Lorsqu’on la compare à une lame de tissu contenant du glycogène, une lame d’extraction de diastase n’aura pas de coloration PAS visible.
| Dispositif histologique | Couleur avec la coloration PAS |
| Glycogène, membranes basales, substances muqueuses, organismes fongiques | Magenta |
| Nucléus | Bleu (avec contre-coloration à l’hématoxyline) |
| Autres éléments tissulaires | Vert (avec contre-coloration vert clair) |
Qui utilise la coloration PAS ?
Cette coloration est largement utilisée à des fins de diagnostic et de recherche. Par exemple, les chercheurs qui étudient les maladies de stockage du glycogène ou les maladies de la membrane basale peuvent examiner systématiquement des sections de tissus colorées au PAS pour évaluer ces éléments respectifs dans les tissus d’intérêt.
Dans les laboratoires de diagnostic, les pathologistes utilisent souvent cette coloration pour aider à répondre aux questions qui peuvent se poser après l’examen de sections de routine colorées à l’hématoxyline et à l’éosine. En particulier, elle peut être utilisée pour aider au diagnostic de :
- Maladies de stockage du glycogène : Il s’agit d’affections dans lesquelles des quantités excessives de glycogène sont stockées dans le foie, les muscles ou les reins. Le PAS est souvent utilisé en routine en clinique pour mettre en évidence l’accumulation de glycogène dans les biopsies de ces tissus.
- Tumeurs : Les granules de glycogène peuvent également être présents dans certaines tumeurs, y compris certaines de celles qui surviennent dans des tissus tels que le pancréas, le poumon et la vessie.
- Infection fongique : Le PAS peut être utilisé pour visualiser certains organismes fongiques dans des coupes de tissus.
- Membranes de soubassement : Comme le PAS peut être utilisé pour mettre en évidence les membranes basales des tissus, il peut être utilisé pour identifier les troubles dans lesquels il y a une faiblesse ou un mauvais fonctionnement des membranes basales – comme dans le cas de certaines maladies glomérulaires du rein.
Pour quoi le PAS est-il le plus souvent utilisé dans votre laboratoire ?
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