Periodic acid-Schiff (PAS) は、組織学研究室でよく使われるもうひとつの特殊染色です。
PAS は何を染色するのですか
(1) 多糖類。 この技術は、一般的に多糖類を識別するために使用されます – これらの高分子は、共有結合によって結合した単糖ユニットで構成されています。 ヒトや動物の組織切片の組織学的染色で同定される主な多糖類はグリコーゲンである。 骨格筋、心筋、肝臓、腎臓など多数の組織に存在する。
(2) 中性粘液物質。 中性粘液物質の染色と同定にもよく使われる。 これには糖タンパク質、糖脂質、中性ムチンなどが含まれ、さまざまな臓器の上皮細胞で産生される。
(3) 組織基底膜:組織基底膜のこと。 網状結合組織のPAS陽性薄層で、上皮や内皮を下層の結合組織に固定・支持する。 真菌類の細胞壁は炭水化物を多く含み、PAS陽性に染色されるものがある。
General Principles of the Stain
PAS法の反応性は、単糖単位の構造に基づく。
染色の最初の反応は、酸化剤として働く過ヨウ素酸によって、隣り合う二つの水酸基間の炭素-炭素結合が酸化される。 これはシッフ反応性アルデヒド基を生成する。
第二の反応では、組織切片はシッフ試薬と反応する。 これは塩基性フクシン、塩酸、メタ重亜硫酸ナトリウムの混合物からなる。
最後に、切片を水洗いすると、組織中の結合したフクシン分子が鮮やかなマゼンタ色を呈する。 色の強さは、単糖類単位にもともと存在する水酸基の濃度に比例する。
ヘマトキシリンはその後、他の組織要素を視覚化するための対染色として通常使用される。
ジアスターゼ(α-アミラーゼ)消化もグリコーゲン貯蔵病の診断の補助に用いられることがある。 ジアスターゼは、デンプン、グリコーゲン、およびこれらの組織多糖類に由来する分解物を加水分解する。 グリコーゲンを含む組織のスライドと比較すると、ジアスターゼ抽出スライドは目に見えるPAS染色を持たない。
組織学的特徴 | PAS Stainによる色調 |
グリコーゲン、基底膜、粘液物質。 真菌 | Magenta |
Nuclei | Blue (with haematoxylin counter stain) |
Other tissue elements | Green (with light green counter stain) |
Who Uses PAS Stain?
この染色は診断と研究の両方の目的で広く使用されています。
診断ラボでは、病理学者がヘマトキシリンとエオシンで染色した切片をルーチンに検査した後に生じる疑問に答えるために、この染色をよく使用します。 特に、
- Glycogen storage diseases(グリコーゲン貯蔵病)の診断に役立てることができます。 肝臓、筋肉、腎臓に過剰なグリコーゲンが貯蔵される疾患です。 これらの組織の生検において、グリコーゲンの蓄積を証明するために、臨床ではしばしばPASがルーチンに用いられます。 グリコーゲン顆粒は、膵臓、肺、膀胱などの組織で発生するものも含め、いくつかの腫瘍にも存在することがあります。 組織切片の一部の真菌を可視化するためにPASを使用することができます。
- 基底膜。
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