グルタルアルデヒドで保存した牛心膜は血管内径に異なる面で展開してもその構造に変化がないことが主な発見である。 その製造は、製造と品質管理の大まかな標準化に従って行われた。 結果に影響を与えうる変動要因を減らすため、心膜は1つの供給源から入手し、パッチは同じ型を用いて作成された。 インプラント部位に動脈瘤壁の形成を伴う材料の拡張があり、それは平滑面を大動脈の光に向けたときに著しく高くなった。 さらに、ウシ心膜パッチは大動脈の壁によく溶け込んでいることが観察され、Piresらが観察したことが確認された。 外科的小売によって提供されるパッチの構造は、犬の大動脈に移植されたとき、保存された形状の明確かつ正確な限界を促進し、それは手術後の最初の月の終わりにすでによく定義されている 。 また、この種の処置は感染症に弱い。
粗面を大動脈に向けた群では、内面に可塑性の高い被覆層の形成、弾性腱や骨の形成をモデル化し、外科用パッチに大きな張力抵抗を与え、その拡張を防いでいることが観察された。 Piresらは、心膜に留置したリテールではこのような計画が全く見られなかったことから、内貼りの線維化はリテール表面に沈着した血液成分の線維性組織に由来するものであると示唆した。 リテールの平坦な縁を大動脈に向けた群では、この現象は縫合線上でより激しく、その部分の粗さと損傷組織によるトロンボプラスチンの局所放出に関連していた。 この結果は，リテールの表面にしわがあることで，血液成分の捕捉と付着が容易になり，その後，血小板因子の放出と損傷組織から放出されるトロンボプラスチンが二次的に集合させることを示唆している． また、このグループでは、薄い内被膜が形成され、その結果、手術のパッチ領域が拡張していることも確認した。 これらの結果は、線維化の内部付着が小売を支え、手術用パッチの構造を強化することを示唆していると思われる。 その組織学的構造は、大きな引張抵抗力を持つ腱の形をした高密度の繊維性結合組織であることを明らかにした
研究者は、なぜグルタルアルデヒドがウシ心膜を血管内腔に異なる面で展開したときにその構造の変化から守るのに役立ったのか、異なる仮説を提示している。 石原らは、グルタルアルデヒドで処理したウシ心膜は漿膜表面の中皮細胞を失い、中膜下層の結合性平滑組織が露出すると報告し、Piresらは心膜表面が舗装細胞と繊維性結合組織の層（彼らは内部付着組織と呼んだ）で覆われていると観察している。 一方、Schoenらは、心膜上での血小板の凝集が石灰化を促進する要因になると報告している。 我々は、動物に移植されたリテールの両側で、内皮からなる内面が形成されていることを確認した。 しかし、粗面を内腔面に向けてリテールを移植した場合、血液を介してウシ心膜から隔離されるため、隣接する大動脈との関係で大動脈拡張の強度と発生率が低下することが確認された。 この被覆がなければ、石灰化の増大が予想される。 さらに、この組織の層は、内腔に向かってしわのある面を持つとき、他の面と区別され、よりよく訓練されることが観察された。 さらに、弾性腱と骨形成をモデル化し、小売りのウシ心膜と同じレベルの外科用パッチを形成したところ、良好な抵抗を示し、大動脈壁によく統合された。 これらのデータは、付着器の内層に多量のカルシウムが存在するとしたPiresらの所見とは一致しない。 著者らは、この石灰化は移植片を覆う繊維組織の骨軟骨化および骨化であり、繊維芽細胞が骨芽細胞に変化したことを示していると仮定している。 しかしながら、我々は、この知見が有効であると確信している。 我々の方法はSucuらによって検証され、石灰化の評価のためにマージされた顕微鏡切片の使用は、パッチからカルシウムを抽出する化学的方法の使用よりも正確であることが実証された
生体組織の石灰化は、生体人工関節の機能不全の主因である。 Schoenら、Chandaら、Vasudevら、Piresらによると、この石灰化は多因子性現象であるが、その定義は明確ではなく、異なる動物モデルで異なっている。 著者らは、血管パッチとして使用されたウシ心膜の石灰化は、人工弁とは異なる意味合いの石灰化であると指摘した。なぜなら、それは弁尖の可動性の低下を意味し、結果として人工弁の機能不全を引き起こすが、人工血管では観察されなかったからである
我々は内腔に面した側に関係なく、小売の石灰化を観察し、動物の腹膜に埋め込まれた小売についても同じことが言える。 しかし，これらの知見は，ラットに移植されたリテールの石灰化を認めたSchoenらやRossiらの知見と一致しない。 著者らは、移植24時間後からウシ心膜の石灰化が起こり、時間とともに漸増することを述べているが、内部組織の付着の有無は報告していない。 腹膜に移植したパッチでは（血流と直接接触することなく）この組織は見つからなかった。 これらの知見は、グルタルアルデヒドで処理した牛心膜の移植部位と血流との直接接触が大きな影響を及ぼすとしたGabbayら、Bortolottiら、Piresらの知見と一致する。 しかし、他のいくつかの産業も同じパッチを生産しています。 業界によっては、石灰化の有病率を減らすために特別な手順を用いているところもある。 例えば、Vascu-Guardを製造しているSynovis社は、Apex-Processingを採用している。 簡単に言うと、このプロセスでは、残留グルタルアルデヒドのレベルは、現在利用可能な高度な分析方法による検出限界以下（< 0.5 ppm）であり、Apex-Processingを受けた製品は、従来の処理を受けた製品を含むさまざまな競合材料よりも4倍低い細胞レベルを持っています
我々のデータによると、腹膜に埋め込まれた小売にはほぼ半数の動物で石灰化が見られませんでした。 腹膜石灰化は、持続的な外来腹膜透析を受けている尿毒症患者に発症するまれな疾患である。 腹膜石灰化が発見された場合、カプセル化した腹膜硬化症を発症していないかどうかを評価することが重要です。
牛心膜は、パッチ形成術や静脈パッチ血管形成術として、大腿動脈や頸動脈の血管再建にも移植されます。 さらに、牛心膜は心臓血管外科だけでなく、ヘルニアや胸部外科でも使用されている。 また、牛心膜は心臓血管の手術だけでなく、ヘルニアや胸部手術にも使用されている。 私たちは、この可能性を調査するために、将来の研究を提案します。
私たちの調査は、対処すべきいくつかの点を提示しています。 しかし、我々は石灰化のみに注目することを目的とした。 ヘマトキシリン・エオジンは組織の石灰化を調べるには最適な方法ではないし、線維化に関係するタンパク質を定量することはできない。 一方、グルタルアルデヒドで保存されたウシ心膜の異なる面を血管パッチとして利用することを検討したのは、本研究が初めてである。 グルタルアルデヒド処理、それに伴う処理組織の硬度上昇、組織内の固定化された細胞物質の存在は、いずれも心血管インプラントの石灰化の要因になる。 我々はパッチの微生物学的な調査は行わなかった。 我々は、今後の研究のためにこの手順を提案する。 牛のパッチが循環している時間は一定ではなく、この要因が我々の知見にバイアスを与えている可能性がある
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