Periodic acid-Schiff (PAS) é outra coloração especial comumente usada no laboratório de histologia.
What Does PAS Stain?
(1) Polissacarídeos: A técnica é comumente usada para identificar polissacarídeos – estas macromoléculas são compostas de unidades monossacarídeo unidas por ligações covalentes. O principal polissacarídeo identificado através da coloração histológica em cortes de tecido humano e animal é o glicogênio. Isto está presente em numerosos tecidos, incluindo músculo esquelético, músculo cardíaco, fígado e rim.
(2) Substâncias neutras do muco: Também é comumente usado para corar e identificar substâncias do muco neutro. Estas podem incluir glicoproteínas, glicolípidos e mucosas neutras, que são produzidas por células epiteliais em diferentes órgãos.
(3) Membranas do porão tecidual: Estas camadas finas PAS-positivas de ancoragem do tecido conjuntivo reticular e epitélio de suporte e endotélio ao tecido conjuntivo subjacente.
(4) Organismos fúngicos: As paredes celulares de alguns organismos fúngicos contêm altos níveis de carboidratos, e também coram PAS-positivo. Entretanto, isto só funciona em fungos vivos.
Princípios Gerais da Mancha
A reatividade da técnica PAS é baseada na estrutura das unidades monossacarídeo.
A primeira reação na mancha envolve ácido periódico atuando como um agente oxidante para oxidar as ligações carbono-carbono entre dois grupos hidroxila adjacentes. Isto produz grupos aldeídos reativos de Schiff.
Na segunda reação, a seção do tecido reage com o reagente de Schiff. Isto compreende uma mistura de fucsina básica, ácido clorídrico, e metabissulfito de sódio. A fuchsina básica na mistura reage com grupos de aldeídos recém-formados no tecido para produzir uma cor magenta brilhante.
Finalmente, quando a seção é enxaguada em água, as moléculas de fuchsina ligadas no tecido então produzem uma cor magenta brilhante. A intensidade da cor é proporcional à concentração de grupos hidroxila originalmente presentes nas unidades monossacarídeo.
Haematoxilina é então tipicamente usada como uma contra-mancha para visualizar outros elementos do tecido. Quando a PAS é usada para demonstrar organismos fúngicos, entretanto, uma contra-mancha verde clara é preferível.
Diastase (alfa-amilase) a digestão também pode ser usada para auxiliar no diagnóstico de doenças de armazenamento de glicogênio. A diastase hidrolise de amido, glicogênio e produtos de decomposição originários desses polissacarídeos teciduais. Quando comparado com uma lâmina de tecido contendo glicogênio, uma lâmina de extração de diastase não terá nenhuma mancha visível de PAS.
| Característica histológica | Cor com mancha PAS |
| Glicogénio, membranas de porão, substâncias mucosas, organismos fúngicos | Magenta |
| Núcleo | Azul (com contra-mancha de hematoxilina) |
| Outros elementos do tecido | Verde (com contra-mancha de verde claro) |
Quem usa a mancha PAS?
Esta coloração é amplamente utilizada tanto para fins de diagnóstico como de pesquisa. Por exemplo, pesquisadores estudando doenças de armazenamento de glicogênio ou doenças da membrana do porão podem rotineiramente examinar seções de tecidos manchados com PAS para avaliar esses respectivos elementos em tecidos de interesse.
Em laboratórios de diagnóstico, patologistas freqüentemente usam essa coloração para ajudar a responder perguntas que podem surgir após examinar seções de rotina de hematoxilina e eosina manchada. Em particular, pode ser usada para ajudar no diagnóstico de:
- Doenças de armazenamento de glicogénio: Estas são condições em que quantidades excessivas de glicogénio são armazenadas no fígado, músculos ou rins. A PAS é frequentemente usada rotineiramente na clínica para demonstrar o acúmulo de glicogênio em biópsias destes tecidos.
- Tumores: Os grânulos de glicogénio também podem estar presentes em alguns tumores, incluindo alguns que surgem em tecidos como o pâncreas, pulmão e bexiga.
- Infecção fúngica: A PAS pode ser usada para visualizar alguns organismos fúngicos em secções de tecidos.
- Basamento de membranas: Como a PAS pode ser usada para destacar as membranas de porão dos tecidos, ela pode ser usada para identificar doenças nas quais há fraqueza ou mau funcionamento das membranas de porão – como no caso de algumas doenças glomerulares no rim.
Para que é a PAS mais comumente usada em seu laboratório?
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