Il nostro principale risultato è stato che il pericardio bovino conservato in glutaraldeide non ha presentato cambiamenti nella sua struttura quando è stato distribuito con diverse facce al lume della nave. La sua produzione ha seguito una grossolana standardizzazione della fabbricazione e del controllo di qualità. Al fine di ridurre le variabili che potrebbero influenzare i risultati, il pericardio è stato ottenuto da una sola fonte e il cerotto è stato fatto con l’aiuto dello stesso stampo.
È importante notare la presenza di un’espansione del dettaglio nella parete aortica. C’era una dilatazione del materiale con la formazione di una parete di aneurisma nel sito dell’impianto, che era significativamente maggiore quando la faccia liscia era rivolta verso la luce dell’aorta. Inoltre, abbiamo osservato che il patch di pericardio bovino era ben integrato nella parete dell’aorta, confermando quanto osservato da Pires et al. La struttura del cerotto fornito dal dettaglio chirurgico, quando impiantato nell’aorta dei cani, promuove limiti chiari e precisi nella forma conservata, ed è già ben definito alla fine del primo mese dopo l’intervento chirurgico . Inoltre, questo tipo di procedura è vulnerabile alle infezioni .
Nel gruppo in cui la faccia ruvida è stata girata nell’aorta, abbiamo osservato la formazione di uno strato di copertura sulla superficie interna con più plasticità, modellando il tendine elastico e la formazione ossea, che ha fornito una maggiore resistenza alla tensione del cerotto chirurgico, impedendo la sua espansione. Pires et al hanno suggerito che la fibrosi dell’apposizione interna ha origine dall’organizzazione fibrosa dei componenti del sangue depositati sulla superficie del dettaglio, perché questo piano non è stato osservato in nessun caso nel dettaglio impiantato nel pericardio. Nel gruppo in cui il bordo piatto della vendita al dettaglio era rivolto verso l’aorta questo fenomeno era più intenso sulla linea di sutura ed era legato alla rugosità della zona e al rilascio locale di tromboplastina da parte dei tessuti danneggiati. I nostri risultati suggeriscono che la faccia rugosa della vendita al dettaglio faciliterebbe la cattura e l’adesione dei componenti del sangue attraverso la sua superficie, con successivo assemblaggio attraverso il rilascio di fattori piastrinici e secondariamente dalla tromboplastina rilasciata dai tessuti danneggiati. Abbiamo anche verificato che in questo gruppo c’era la formazione di un sottile strato di copertura interna, con conseguente dilatazione della zona di intervento. Questi risultati possono suggerire che l’apposizione interna della fibrosi sosterrebbe la vendita al dettaglio e rafforzerebbe la struttura del cerotto chirurgico. La sua struttura istologica rivela un tessuto connettivo fibroso denso a forma di tendine con grande resistenza alla trazione.
I ricercatori hanno offerto diverse ipotesi per spiegare perché la glutaraldeide ha contribuito a preservare il pericardio bovino da cambiamenti nella sua struttura quando è stato distribuito con diverse facce al lume del vaso. Ishihara et al hanno riferito che il pericardio bovino trattato con glutaraldeide perde le cellule mesoteliali della superficie sierosa, esponendo lo strato submesoteliale di tessuto connettivo liscio, mentre Pires et al hanno osservato che la superficie del pericardio era coperta da uno strato di cellule pavimentali e tessuto connettivo fibroso, che hanno chiamato tessuto di apposizione interna. D’altra parte Schoen et al hanno riferito che l’aggregazione piastrinica, sulla membrana pericardica, sarebbe un fattore di accelerazione del processo di calcificazione. Abbiamo osservato che in entrambi i lati della vendita al dettaglio impiantata negli animali, si è formata una superficie interna composta da endotelio. Tuttavia, quando la vendita al dettaglio è stata impiantata con il lato ruvido rivolto verso la superficie del lume, è stata isolata dal pericardio bovino attraverso il sangue, riducendo così l’intensità e l’incidenza della dilatazione aortica rispetto all’aorta adiacente. Senza questa copertura, ci aspetteremmo un aumento della calcificazione. Inoltre, abbiamo osservato che questo strato di tessuto era differenziato dagli altri lati e meglio formato quando aveva la faccia rugosa verso il lume. Inoltre, modellando il tendine elastico e la formazione dell’osso, si formava un cerotto chirurgico a livello del pericardio bovino al dettaglio che aveva una buona resistenza ed era ben integrato nella parete aortica, probabilmente a causa dell’uniformità risultante dal processo di stampaggio.
La presenza di metaplasia osteo-cartilaginea nello strato fibroso di apposizione interna è stata osservata in un solo caso come un focus isolato, verificandosi nel gruppo in cui la faccia rugosa era rivolta nell’aorta. Questi dati non sono in accordo con i risultati di Pires et al che hanno descritto una grande quantità di calcio presente nello strato interno dell’apposizione. Gli autori hanno ipotizzato che questa calcificazione rappresentasse una metaplasia osteo-cartilaginea e l’ossificazione del tessuto fibroso che copre l’innesto, indicando la trasformazione del fibroblasto in osteoblasti. Ciononostante, ci sentiamo sicuri della validità dei nostri risultati. La nostra metodologia è stata convalidata da Sucu et al che ha dimostrato che l’uso di sezioni microscopiche unite per la valutazione della calcificazione era più preciso dell’uso del metodo chimico di estrazione del calcio dal patch.
La calcificazione del tessuto biologico è la causa principale della disfunzione delle bioprotesi. Secondo Schoen et al , Chanda et al , Vasudev et al e Pires et al questa calcificazione è un fenomeno multifattoriale, ma non è ben definito e varia in diversi modelli animali. Gli autori hanno sottolineato che la calcificazione nel pericardio bovino usato come patch vascolare presenta una connotazione diversa di calcificazione rispetto alle protesi valvolari, perché implica una riduzione della mobilità del lembo, con conseguente disfunzione della protesi, che non è stata osservata negli innesti vascolari.
Abbiamo osservato la calcificazione del dettaglio indipendentemente dal lato rivolto verso il lume; lo stesso era vero per quanto riguarda il dettaglio impiantato nel peritoneo dell’animale. Tuttavia, questi risultati non sono coerenti con quelli di Schoen et al e Rossi et al che hanno trovato la calcificazione della vendita al dettaglio impiantata nei ratti. Gli autori hanno descritto la calcificazione del pericardio bovino a partire da 24 ore di impianto e progressivamente aumentata con il tempo, ma non hanno riportato la presenza di apposizione di tessuto interno. Non abbiamo trovato questo tessuto nei cerotti impiantati nel peritoneo (senza contatto diretto con il flusso sanguigno). Questi risultati sono coerenti con quelli di Gabbay et al , Bortolotti et al e Pires et al , che hanno indicato le maggiori influenze del sito di impianto del pericardio bovino trattato con glutaraldeide e il suo contatto diretto con il flusso sanguigno.
Abbiamo usato un pericardio bovino prodotto da Braile Biomedica. Tuttavia, diverse altre industrie producono lo stesso cerotto. Alcune industrie utilizzano procedure speciali per ridurre la prevalenza della calcificazione. Per esempio, Synovis, che produce Vascu-Guard, segue l’Apex-Processing. In breve, in questo processo, i livelli di glutaraldeide residua sono al di sotto dei limiti di rilevamento da parte dei sofisticati metodi analitici ora disponibili (< 0,5 ppm) e i prodotti sottoposti ad Apex-Processing hanno livelli di cellularità che sono quattro volte inferiori a una varietà di materiali concorrenti, compresi i prodotti trattati convenzionalmente.
Secondo i nostri dati, non c’era calcificazione nel dettaglio impiantato nel peritoneo in quasi metà degli animali. La calcificazione peritoneale è una condizione rara sviluppata nei pazienti uremici in dialisi peritoneale ambulatoriale continua. Una volta rilevata la calcificazione peritoneale, è essenziale valutare se si sviluppa una sclerosi peritoneale incapsulante.
Il pericardio bovino viene anche impiantato per la ricostruzione vascolare nell’arteria femorale o carotidea come patchplastica e angioplastica venosa. Inoltre, il pericardio bovino non è utilizzato solo in chirurgia cardiovascolare, ma anche in chirurgia dell’ernia o toracica. Sulla base dei nostri dati, confermiamo l’uso della faccia ruvida in questi tipi di chirurgia. Proponiamo studi futuri per indagare questa possibilità.
La nostra indagine presenta alcuni punti che dovrebbero essere affrontati: non abbiamo eseguito analisi del sangue, cioè, colesterolo, trigliceridi e livelli di glucosio nel sangue. Tuttavia, abbiamo voluto concentrarci solo sulla calcificazione. L’ematossilina e l’eosina non è il metodo migliore per studiare la calcificazione dei tessuti e non quantifica le proteine legate alla fibrosi. D’altra parte, questo è il primo studio per indagare l’utilizzo di diverse facce del pericardio bovino conservato in glutaraldeide come una patch vascolare. Il trattamento con glutaraldeide, il conseguente aumento della rigidità del tessuto trattato e la presenza di materiale cellulare fisso nel tessuto sono tutti fattori che contribuiscono alla calcificazione degli impianti cardiovascolari. Non abbiamo eseguito indagini microbiologiche sul cerotto. Suggeriamo questa procedura per studi futuri. Il tempo in cui il cerotto bovino è rimasto in circolazione non è stato costante, forse questo fattore può essere una distorsione per i nostri risultati.