Promotori/Catalogo/T7

Descrizione

I promotori T7 possono produrre alti livelli di trascrizione in E. coli quando T7 RNAP è presente. Il secondo vantaggio dei promotori T7 è che non sono riconosciuti da E. coli RNAP, rendendo i promotori T7 capaci di una regolazione indipendente dai promotori E. coli. Poiché un forte promotore T7 attivo può arrestare completamente la crescita di E. coli a causa dell’alto livello di consumo di risorse (ad esempio nucleotidi) da parte del T7 RNAP, è in genere necessario regolare i livelli di T7 RNAP o il promotore T7 o entrambi. Come tale la famiglia dei promotori T7 contiene sia promotori costitutivi che promotori regolati negativamente che possono essere spenti da una proteina repressore. Il ceppo cellulare più comune da usare con un sistema di promotore T7 è BL21(DE3) che è un ceppo di E. coli B che contiene un lisogeno λ con un gene T7 RNAP inducibile sul cromosoma. Tuttavia, è possibile ingegnerizzare molti altri ceppi di E. coli per esprimere condizionatamente T7 RNAP.

Ottenere la collezione di promotori T7

Le sequenze dei promotori T7 si trovano nella tabella sottostante. Per ottenere il DNA fisico, si consigliano due approcci –
Via sintesi de novo: Dato che i promotori sono sequenze relativamente corte, possono essere ordinati come due oligo a singolo filamento sovrapposti che vengono ricotti ed estesi per costruire i promotori completi. Vedere questo protocollo OpenWetWare su come costruire parti tramite ricottura oligo ed estensione. In alternativa i promotori possono essere ordinati come geni corti da una società come Geneart.

Via la distribuzione Registry: Alcuni dei promotori sono disponibili nell’attuale distribuzione del registro, vedi la colonna della disponibilità nella tabella sottostante.

Progettazione & Costruzione

I promotori T7 nella collezione sono stati progettati e costruiti da diversi gruppi. Tuttavia, esiste solo il T7 RNAP e quindi un solo tipo di promotore T7. La sequenza di consenso per i promotori T7 può essere dedotta dal logo di sequenza per i promotori T7 mostrato sulla destra.

Collezione di promotori T7

Più…

Nome	Descrizione	Sequenza promotore	Positivo Regolatore	Negativo Regolatore	Lunghezza	Doc	Stato
BBa_I712074	Promotore T7 (promotore forte da batteriofago T7)	. . . agggaatacaagctacttgttctttgca			46	1938	In stock
BBa_I719005	T7 Promoter	taatacgactcactatagggaga		23	7912	In magazzino
BBa_J34814	T7 Promoter	gaatttaatacgactcactatagggaga			28	1190	Non in stock
BBa_J64997	T7 consensus -10 e resto	taatacgactcactatagg			19	10154	È complicato
BBa_K113010	Soprapposizione del promotore T7	. . . gagtcgtattaatacgactcactatagggg			40	1553	È complicato
BBa_K113011	più promotore T7 sovrapposto	. . agtgagtcgtacgactcactatagggg			37	1601	È complicato
BBa_K113012	Potenziatore T7 sovrapposto	. . gagtcgtattaatacgactctatagggg			40	1630	È complicato
BBa_K1614000	Promotore T7 per espressione di RNA funzionale	taatacgactcactatag			18	5219	In stock
BBa_K3511008	C62-T7 promotore	taatacgactcacaatcgcggag			23
BBa_K3633015	T7 promotore	taatacgactcactatagg			19		È complicato
BBa_K525998	Promoter T7 e RBS	. . . atacgactcactatagggaaagaggagaaa			32	3036	In stock
BBa_R0085	Sequenza promotore di consenso T7	taatacgactcactatagggaga		23	2072	In magazzino
BBa_R0180	Promotore T7 RNAP	ttatacgactcactagggaga			23	1654	Non in stock
BBa_R0181	T7 RNAP promoter	gaatacgactcactatagggaga			23	1651	Non disponibile
BBa_R0182	Promotore di T7 RNAP	taatacgtctcactatagggaga			23	1653	Non in magazzino
BBa_R0183	Promotore T7 RNAP	tcatacgactcactatagggaga			23	1653	Non in stock
BBa_R0184	Promotore T7 (lacI repressibile)	. . ataggaattgtgagcggataacaattcc			44	1176	Non in stock
BBa_R0185	Promotore T7 (lacI repressibile)	. . ataggaattgtgagcggataacaattcc			44	1888	Non in stock
BBa_R0186	Promotore T7 (lacI repressible)	. . ataggggaattgagcggataacaattcc			44	1885	Non in stock
BBa_R0187	Promotore T7 (lacI repressibile)	. . ataggaattgtgagcggataacaattcc			44	1885	Non in stock
BBa_Z0251	T7 promotore forte	. . taatacgactcactatagggagaccacaac			35	1887	Non in stock
BBa_Z0252	T7 legame debole e processività	. . taattgaactcactaaagggagaccacagc			35	1667	Non in stock
BBa_Z0253	T7 promotore di legame debole	. . cgaagtaatacgactcactattagggaaga			35	1400	Non in stock