De Wallace-lijn (of ‘Wallace’s Line’) is een grens die de ecozone van Azië en de Australaziatische ecozone scheidt. De overgangszone wordt ook wel Wallacea genoemd.
Planten en dieren die verwant zijn aan Aziatische soorten worden in het noordwesten aangetroffen. Australaziatische soorten worden vooral in het zuidoosten aangetroffen, met enkele Aziatische soorten. De lijn is genoemd naar Alfred Russel Wallace, die deze duidelijke scheidslijn opmerkte tijdens zijn reizen door Oost-Indië in de 19e eeuw.
De lijn loopt door Indonesië, tussen Borneo en Sulawesi (Celebes); en door de Straat van Lombok tussen Bali (in het westen) en Lombok (in het oosten).
De afstand tussen Bali en Lombok is slechts ongeveer 35 kilometer. Verrassend is dat de verspreiding van veel vogelsoorten de lijn volgt, omdat veel vogels zelfs de kleinste stukken open oceaanwater niet oversteken. Sommige vleermuizen hebben een verspreidingsgebied dat de Wallace-lijn overschrijdt, maar andere zoogdieren zijn over het algemeen beperkt tot de ene of de andere kant; een uitzondering is de krabetende makaak. Andere groepen planten en dieren vertonen afwijkende patronen, maar het algemene patroon is opvallend en redelijk consistent.
De term ‘Wallace’s Line’ werd voor het eerst gebruikt door Huxley in 1868.