Strin to: Vævsbehandling
Når donoren har gennemgået screeningsprocessen, tages der flere skridt for at sikre en standardiseret behandling af allograftvævet. Alle væv behandles med “aseptiske” teknikker, som omfatter standardteknikker på operationsstuer. Når væv udtages fra donoren, er udtrykket høst respektfuldt blevet erstattet med udtagning. Der er tidsgrænser for, hvornår væv skal udtages. Der er fastsat et vindue på 24 timer, inden for hvilket kroppens væv skal udtages efter AATB-standarder.
Udtagning foregår oftest i en operationsstue eller i et udpeget udtagningscenter. Lejlighedsvis kan det ske i et lighus. Et team af teknikere assisterer ved denne kirurgiske procedure. Operationsteknikkerne på operationsstuen, herunder forberedelse og afdækning af donor, svarer til dem, der anvendes i forbindelse med standardoperationsprotokoller. Der anvendes steril teknik med afdækninger, kåber, handsker og sterile instrumenter. Hvert væv udtages, dyrkes, pakkes ind, mærkes, forsegles og sendes i særlige beholdere ved frysepunktstemperatur. Størstedelen af disse væv udtages ved hjælp af denne aseptiske teknik til udtagning af væv. Der kan forekomme kontaminering under denne proces eller under overførslen til beholderne, inden de ankommer til vævsbanken. Denne aseptiske teknik bør ikke betragtes som en steril proces. Det er dokumenteret, at kontaminering kommer fra donorens mave-tarm- eller luftveje (agonal kontaminering).10,12 Nylige udbrud har dokumenteret denne kontaminering efter døden med nedbrydning af mave-tarmsystemet samt inddrivelse efter asystoli på sene tidspunkter uden for vævsbankernes standarder.23
Vævsbanker undersøger bioburden på vævsoverfladen og den ledsagende vævsvæske af modtagne væv. Bioburden defineres som antallet af kontaminerede organismer, der findes i en given mængde materiale, inden det underkastes en steriliseringsprocedure. Allograftvæv har en kompleks fysisk overflade med revner og sprækker, som gør det vanskeligt at fjerne alle potentielle patogener. Det er dokumenteret, at overflade-swabkulturer kun er 70 % til 92 % følsomme.26 U.S. Pharmacopeial Convention,18 den medicinske industristandard for sterilitetstestning og andre kvalitetskontrolprocedurer, har erklæret, at swabkulturer ikke bør anvendes som endeligt bevis for sterilisation. Kulturer bør bruges til at overvåge tidligere validerede steriliseringsprocesser. Nogle vævsbanker vil afvise væv, hvis der er en stor mængde bioforurening, når de først modtager vævet.
Ved behandling af væv bestræber vævsbankerne sig på at rense og sterilisere væv til transplantation. Sterilisering er defineret som en proces, der dræber alle former for liv, især mikroorganismer. Sterilitet er blevet udtrykt som en matematisk sandsynlighed for risiko. FDA har fastsat et sterilitetsforsikringsniveau (SAL) på 10-3 som passende for implantabelt medicinsk biologisk udstyr. Det betyder, at der er en chance (sandsynlighed) på 1 ud af 1000 for, at der kan findes en levende levedygtig mikrobe i eller på det implantable udstyr. Konventionelle muskuloskeletale allotransplantater klassificeres rutinemæssigt som HCT/P af FDA/Center for Biologics Evaluation in Research (CBER). Association for the Advancement of Medical Instrumentation (AAMI)4 anfører, at en SAL-værdi på 10-6 er passende for medicinsk udstyr. I øjeblikket kræver AATB en SAL på 10-6 som deres standard, hvilket er forskelligt fra FDA’s standard.3
De større vævsbanker i USA anvender i øjeblikket forskellige sterilisations- og validerede behandlingsteknikker. Der udvikles fortsat nyere behandlingsteknikker for at forbedre vævssikkerheden. De fleste steriliseringsprocesser er baseret på behandling af væv “spiked” med forskellige patogener, eller vævene er dukket op eller dyppet i væsker, der indeholder de pågældende patogener. Biologisk set er dette ikke det samme som væv, der er blevet “systemisk” inficeret. Validiteten af disse testteknikker skal undersøges nærmere.
FDA er det øverste styrende organ for vævsbankindustrien, men angiver ikke specifikt, hvilken sterilisationsbehandlingsteknik der er den bedste, eller hvilken der bør anvendes. Inden for rammerne af de seneste regler for GTP kræver FDA, at alle vævsbanker, der sammen med deres mærkning afgiver en skriftlig erklæring om sterilitet af allotransplantater, vil blive underkastet overraskende inspektioner og gennemgang af FDA.19,22 Hver vævsbank skal have validerede data for deres erklæringer om sterilitet ved deres individuelle vævsbehandlingsmetode. De fleste vævsbanker anvender en proprietær formel af forskellige biologiske rengøringsmidler, alkohol, antibiotika og hydrogenperoxid.
Tabel 9-1 indeholder eksempler på nogle af de vigtigste vævsbankprocesser, herunder formler som Allowash XG fra Lifenet, som anvender en skrubbeteknik og intensive dekontamineringstrin med alkohol, antibiotika og hydrogenperoxid. BioCleanse vævsprocessen fra Regeneration Technologies, Inc. (RTI), anvender en automatiseret proces med vakuumtryk og lav temperatur med hydrogenperoxid og alkohol. Musculoskeletal Transplantation Foundation (MTF) anvender en allograftvævsrensningsproces (ATP), en proces med et ikke-konisk detergent, hydrogenperoxid og alkohol med en antibiotikacocktail. Tissue Bank International (TBI) har TranZgraft, en proprietær steriliseringsproces, der anvendes ved lav temperatur. Allosource anvender Validated Sterilizer som en desinfektionsproces. Disse vævsbanker har valideret deres individuelle proprietære steriliseringsprocesser til et SAL-niveau på 10-6
Alle vævsbehandlingsmetoder bør være effektive til inaktivering af vira og aflivning af bakterier. Den skal effektivt trænge ind i vævet og fjernes sikkert fra vævet, samtidig med at vævets mekaniske og biologiske egenskaber bevares.
Ingen dokumenteret teknik er mere effektiv til behandling eller sterilisering af allograftvæv til human brug. Der er behov for langtidsundersøgelser for at evaluere de forskellige behandlingsteknikker over tid. Ikke alle allografts af blødt væv i muskuloskeletale organer kan steriliseres sikkert. Kondrocytterne i ledbruskalloplastik kan blive uopretteligt beskadiget af forskellige behandlingsteknikker.
Gammastråling er et meget effektivt steriliseringsmiddel, der genererer frie radikaler, som kan påvirke kollagens struktur negativt. Det er dokumenteret, at højere stråledoser er skadelige for vævet, og på nuværende tidspunkt anvendes lavdosisstråling almindeligvis af vævsbanker til at fjerne overfladekontaminanter.6,9
Et fåtal vævsbanker anvender en frysetørringsproces (lyofilisering). Dette gør det muligt at opbevare allograftvævet ved stuetemperatur i en forseglet emballage. Denne lyofiliseringsproces fryser vævet, og vandindholdet reduceres til mindre end 6 % af dets oprindelige vægt. Dette sker ved en primær tørringsproces kaldet sublimering, som efterfølges af en sekundær tørringsproces kaldet desorption. Denne reduktion af vandindholdet understøtter ikke nogen biologisk aktivitet eller kemiske reaktioner i vævet. Generelt anvendes frysetørrede allotransplantater ikke almindeligvis til sportsmedicinske formål i USA. De anvendes i vid udstrækning til ikke-ortopædiske genopbygningsprocedurer inden for neurokirurgi og urologi.