Etape deux : traitement des tissus
Après que le donneur ait passé le processus de sélection, plusieurs étapes sont prises pour assurer un traitement standardisé des allogreffes de tissus. Tous les tissus sont traités avec des techniques « aseptiques », qui intègrent les techniques standard des salles d’opération. Lorsque les tissus sont obtenus du donneur, le terme « prélèvement » a été respectueusement remplacé par « récupération ». Il existe des délais pour la récupération des tissus. Une fenêtre de 24 heures est établie pendant laquelle les tissus du corps doivent être récupérés selon les normes de l’AATB.
La récupération se fait le plus souvent dans une salle de bloc opératoire ou dans un centre de récupération désigné. Occasionnellement, elle peut être effectuée dans une morgue. Une équipe de techniciens aide à cette procédure chirurgicale. Les techniques de la salle d’opération, y compris la préparation et le drapage du donneur, sont similaires à celles des protocoles opératoires standard. Une technique stérile est utilisée avec des draps, des blouses, des gants et des instruments stériles. Chaque tissu est prélevé, mis en culture, emballé, étiqueté, scellé et expédié dans des conteneurs spéciaux à des températures de congélation. La majorité de ces tissus sont récupérés avec cette technique aseptique de récupération des tissus. Une contamination peut se produire pendant ce processus ou pendant le transfert dans les conteneurs avant d’arriver à la banque de tissus. Cette technique aseptique ne doit pas être considérée comme un processus stérile. La contamination a été documentée comme provenant des voies gastro-intestinales ou respiratoires du donneur (contamination agonale).10,12 Des épidémies récentes ont documenté cette contamination après la mort avec la panne du système gastro-intestinal ainsi que la récupération après une asystole à des moments tardifs en dehors des normes de la banque de tissus.23
Les banques de tissus examinent la charge biologique de la surface du tissu et du fluide tissulaire d’accompagnement des tissus reçus. La charge biologique est définie comme le nombre d’organismes contaminés trouvés dans une quantité donnée de matériel avant de subir une procédure de stérilisation. Les allogreffes de tissus ont une surface physique complexe avec des fissures et des craquelures qui rendent difficile l’élimination de tous les pathogènes potentiels. Les cultures sur écouvillon de surface sont documentées comme n’étant sensibles qu’à 70 % à 92 %.26 La Convention pharmacopée américaine18, la norme de l’industrie médicale pour les tests de stérilité et autres procédures de contrôle de la qualité, a déclaré que les cultures sur écouvillon ne devraient pas être utilisées comme preuve définitive de stérilisation. Les cultures doivent être utilisées pour contrôler les processus de stérilisation préalablement validés. Certaines banques de tissus rejetteront les tissus s’il y a une grande quantité de biocontamination lorsqu’elles reçoivent initialement le tissu.
Lorsqu’elles traitent les tissus, les banques de tissus s’efforcent de nettoyer et de stériliser les tissus destinés à la transplantation. La stérilisation est définie comme un processus qui tue toutes les formes de vie, en particulier les micro-organismes. La stérilité a été exprimée comme une probabilité mathématique de risque. La FDA a établi un niveau d’assurance de stérilité (SAL) 10-3 comme adéquat pour les dispositifs médicaux biologiques implantables. Cela signifie qu’il y a une chance sur 1000 (probabilité) qu’un microbe vivant viable puisse exister dans ou sur le dispositif implantable. Les allogreffes musculo-squelettiques conventionnelles sont systématiquement classées comme HCT/P par la FDA/Center for Biologics Evaluation in Research (CBER). L’Association for the Advancement of Medical Instrumentation (AAMI)4 indique qu’un SAL de 10-6 est approprié pour les dispositifs médicaux. Actuellement, l’AATB exige un SAL de 10-6 comme norme, différente de celle de la FDA.3
Différentes techniques de stérilisation et de traitement validées sont actuellement utilisées par les principales banques de tissus à travers les États-Unis. De nouvelles techniques de traitement continuent d’être développées pour améliorer la sécurité des tissus. La plupart des processus de stérilisation sont basés sur le traitement de tissus « dopés » avec différents agents pathogènes ou les tissus sont émergés ou trempés dans des fluides contenant les agents pathogènes d’intérêt. D’un point de vue biologique, ce n’est pas la même chose que des tissus qui ont été infectés de manière « systémique ». La validité de ces techniques de test doit être étudiée plus avant.
La FDA est l’organe directeur ultime sur l’industrie des banques de tissus, mais elle ne déclare pas spécifiquement quelle technique de traitement de stérilisation est la meilleure ou laquelle devrait être utilisée. Dans le cadre des règles récentes de la GTP, la FDA exige que tout établissement de banque de tissus qui fait une déclaration écrite de stérilité des allogreffes avec son étiquetage soit soumis à des inspections surprises et à un examen par la FDA.19,22 Chaque banque de tissus doit avoir des données validées pour ses déclarations de stérilité par sa méthode individuelle de traitement des tissus. La plupart des banques de tissus utilisent une formule propriétaire de différents détergents biologiques, d’alcool, d’antibiotiques et de peroxyde d’hydrogène.
Le tableau 9-1 énumère des exemples de quelques-uns des principaux procédés des banques de tissus, y compris des formules telles que Allowash XG de Lifenet, qui utilise une technique de frottement et des étapes de décontamination intensive avec de l’alcool, des antibiotiques et du peroxyde d’hydrogène. Le procédé de traitement des tissus BioCleanse de Regeneration Technologies, Inc. (RTI), utilise un processus automatisé à basse température sous vide et pression avec du peroxyde d’hydrogène et de l’alcool. La Musculoskeletal Transplantation Foundation (MTF) utilise un procédé de purification des allogreffes de tissus (ATP), un procédé à base de détergent non-conique, de peroxyde d’hydrogène et d’alcool avec un cocktail d’antibiotiques. Tissue Bank International (TBI) utilise TranZgraft, un procédé de stérilisation breveté utilisé à basse température. Allosource utilise le Validated Sterilizer comme procédé de désinfection. Ces banques de tissus ont validé leurs processus de stérilisation propriétaires individuels à un niveau SAL de 10-6
Toute méthode de traitement des tissus devrait être efficace pour inactiver les virus et tuer les bactéries. Elle doit pénétrer efficacement dans le tissu et être retirée du tissu en toute sécurité tout en préservant les propriétés mécaniques et biologiques du tissu.
Aucune technique éprouvée n’est plus efficace pour traiter ou stériliser les allogreffes de tissu à usage humain. Des études à long terme sont nécessaires pour évaluer les différentes techniques de traitement dans le temps. Toutes les allogreffes musculo-squelettiques de tissus mous ne peuvent pas être stérilisées en toute sécurité. Les chondrocytes des allogreffes de cartilage articulaire peuvent être irrémédiablement endommagés par différentes techniques de traitement.
Les radiations gamma sont un agent de stérilisation très efficace qui génère des radicaux libres, qui peuvent affecter négativement la structure du collagène. Il a été documenté que des doses plus élevées de rayonnement sont délétères pour le tissu, et à l’heure actuelle, le rayonnement à faible dose est couramment utilisé par les banques de tissus pour éliminer les contaminants de surface.6,9
Un petit nombre de banques de tissus utilisent un processus de lyophilisation (lyophilisation). Cela permet de conserver l’allogreffe de tissu à température ambiante dans un emballage scellé. Ce processus de lypophilisation congèle le tissu et la teneur en eau est réduite à moins de 6% de son poids initial. Cela se fait par un processus de séchage primaire appelé sublimation, qui est suivi d’un processus de séchage secondaire appelé désorption. Cette réduction de la teneur en eau ne favorise aucune activité biologique ou réaction chimique dans le tissu. En général, les allogreffes lyophilisées ne sont pas couramment utilisées pour des applications de médecine sportive aux États-Unis. Elles sont largement utilisées pour les procédures de reconstruction non orthopédiques dans les domaines neurochirurgical et urologique.