¿Qué es un anticuerpo antiidiotípico?

Como se muestra en la figura 1, un anticuerpo antiidiotípico (Anti-ID) se une al idiotipo de otro anticuerpo, normalmente un fármaco anticuerpo. Un idiotipo puede definirse como la combinación específica de idiotopos presentes en las regiones determinantes del complemento (CDR) de un anticuerpo. Un idiotopo único es una región específica dentro de la región Fv de un anticuerpo que se une al paratopo (sitio de unión del epítopo antigénico) de un anticuerpo diferente. Por lo tanto, un idiotopo puede considerarse casi sinónimo de un determinante antigénico de un anticuerpo.

Figura 1. Estructura del anticuerpo antiidiotipo. (A) El paratopo de un fármaco anticuerpo se unirá al epítopo de un antígeno diana dentro de la región CDR del fármaco anticuerpo. (B) El paratopo de un anti-ID se unirá al idiotopo de su fármaco anticuerpo diana. El idiotopo está dentro de la región CDR del fármaco anticuerpo y puede estar al lado, idéntico o lejos del sitio de unión al antígeno del fármaco anticuerpo.

Tipos de anticuerpos antiidiotipo

Hay tres clasificaciones principales de anticuerpos antiID basados en la detección, como se muestra en la figura 2. La primera es un anticuerpo anti-ID de bloqueo de antígeno, llamado así porque el paratopo y el idiotopo de los anticuerpos de detección se superponen entre sí. Por ello, el antígeno diana del fármaco anticuerpo y el anticuerpo anti-ID competirán entre sí. Por lo tanto, esta forma de anticuerpo anti-ID sólo detectará el fármaco anticuerpo libre. La segunda clasificación de anticuerpos anti-ID se denomina no bloqueante porque el paratopo y el idiotopo del fármaco anticuerpo no se solapan. Por lo tanto, el anticuerpo anti-ID y el antígeno pueden unirse simultáneamente al fármaco anticuerpo sin afectar a la capacidad de unión del otro. Por ello, los anticuerpos anti-ID no bloqueantes se utilizan para detectar todas las formas de fármaco anticuerpo disponible (libre o unido al antígeno). La tercera clasificación del anticuerpo anti-ID es un anti-ID específico complejo. Esto se debe a que el anticuerpo anti-ID no puede unirse al fármaco anticuerpo a menos que el fármaco ya esté unido a su antígeno. Por lo tanto, este tipo de anticuerpo anti-ID sólo es capaz de detectar el fármaco anticuerpo unido.

Figura 2. Tipos de anticuerpos antiidiotipo. (A) Los anti-IDs bloqueadores de antígeno se unen directamente al sitio de unión del antígeno de un fármaco anticuerpo, compitiendo directamente con el antígeno diana. (B) El idiotipo al que se unen los anti-IDs no bloqueantes no se solapa en absoluto con el paratope del fármaco anticuerpo, permitiendo que el fármaco anticuerpo se una a su antígeno diana y a un anti-ID simultáneamente. (c) Los anti-IDs específicos complejos sólo se unirán al idiotopo de un fármaco anticuerpo cuando dicho fármaco ya esté unido a su antígeno apropiado.

Usos de los anticuerpos antiidiotipo

Ensayos farmacocinéticos

Dado que la mayoría de los anticuerpos antiidiotipo se generan contra un fármaco anticuerpo específico, se utilizan habitualmente en las prácticas preclínicas para el análisis farmacocinético (PK). La PK es el estudio del metabolismo de los fármacos en todo el organismo. En concreto, los médicos determinarán la tasa de absorción, distribución, biodisponibilidad y excreción del fármaco en varias cohortes de pacientes. Para lograrlo, los investigadores deben ser capaces de rastrear los fármacos con anticuerpos que están unidos o no a su objetivo designado en varios puntos de tiempo después de la entrega. Mediante el uso de anti-IDs, principalmente mAb’s, se pueden rastrear y cuantificar fácilmente varias formas de terapias de anticuerpos en el suero, la sangre, la orina u otros fluidos corporales del paciente. En la figura 3 se muestran ejemplos de ensayos farmacocinéticos (formato ELISA) que utilizan anti-IDs.

Figura 3. Tipos de ensayos PK basados en ELISA. Hay 4 formas comunes de realizar un ensayo PK basado en ELISA. (1) El ensayo de captura de antígeno implica una placa recubierta de antígeno que se puede unir al fármaco de anticuerpos libres. A continuación, se lava un anti-ID marcado sobre el fármaco anticuerpo, se une y se visualiza. Se utiliza un protocolo de visualización similar para los otros tres tipos de ensayos PK. (2) Un ensayo de puente anti-ID implica una placa recubierta de anti-ID que se lava con un fármaco de anticuerpo libre seguido de un anti-ID marcado. (3) Un ensayo de captura de anti-ID en sándwich implica una placa recubierta de anti-ID que se lava con una región IgG anticonstante marcada. (4) Un ensayo de puenteo de antígeno anti-ID es cuando una placa recubierta de anti-ID se lava con el fármaco anticuerpo unido a un antígeno marcado.

Ensayos de inmunogenicidad

Los anti-ID policlonales se utilizan habitualmente para ensayos de inmunogenicidad como controles de referencia. La inmunogenicidad es la capacidad de una terapia, como un fármaco con anticuerpos, de inducir una respuesta inmunitaria humoral y/o mediada por células que conduce al desarrollo de anticuerpos antifármaco (ADA). Los ADAs conducen a la negación de todos los efectos relacionados con el fármaco anticuerpo, inhibiendo esencialmente el aspecto terapéutico del fármaco.Por lo tanto, es extremadamente importante para los investigadores analizar la inmunogenicidad de un nuevo fármaco anticuerpo durante el análisis preclínico. Un ADA es muy similar a un anti-ID, ya que ambos se unen al mismo anticuerpo, por lo que se puede utilizar un conjunto de anti-ID policlonales como controles positivos al analizar la presencia de ADA en las muestras de los pacientes. En la figura 4 se muestra un ejemplo de ensayo de inmunogenicidad basado en ELISA utilizando un anti-ID como control positivo.

Figura 4. Tipos de ensayos de inmunogenicidad. (A) Si un fármaco anticuerpo induce el desarrollo de ADAs, los ADAs pueden visualizarse mediante un ELISA de unión directa. En este ensayo, una placa recubierta de anticuerpos se lava con suero. A continuación, la placa se lava con una IgG marcada que sólo se une a la región constante de los ADA. Por lo tanto, el ELISA sólo será fluorescente si hay ADAs presentes en el suero de la muestra. (B) Un ensayo ELISA de puente es cuando una placa recubierta con un fármaco de anticuerpo será expuesta a suero que contiene ADA que se une a una región ScFv de un fármaco de anticuerpo. La región ScFv de ADA restante se unirá a una versión marcada del mismo fármaco anticuerpo. Ambos ensayos deben analizarse a través de un control positivo, como los anti-IDs.

Paquetes de generación de anticuerpos anti-idiotipo de GenScript

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