O que é um Anticorpo Anti-Idiotípico?

Como mostrado na figura 1, um anticorpo anti-idiotípico (Anti-ID) liga-se ao idiótipo de outro anticorpo, geralmente um medicamento anti-corpo. Um idiótipo pode ser definido como a combinação específica de idótipos presentes dentro de um complemento de anticorpos que determinam regiões (CDRs). Um único idótopo, é uma região específica dentro de uma região de anticorpos Fv que se liga ao paratótopo (local de ligação do epitótopo antigênico) de um anticorpo diferente. Portanto, e idiotope pode ser considerado quase sinônimo de um determinante antigênico de um anticorpo.

Figure 1. Estrutura do anticorpo anti-idiótipo. (A) O paratope de um medicamento anticorpo ligar-se-á ao epitópo de um antígeno alvo dentro da região do CDR dos medicamentos anti-corpos. (B) O paratope de um anti-idiótipo ligar-se-á ao idótopo do seu antibiótico alvo. O idótopo está dentro da região CDR da droga anti-corpo e pode estar próximo, idêntico também, ou longe do local de ligação do antígeno da droga anti-corpo.

Tipos de Anticorpos Anti-Idiótipo

Existem três classificações principais de anticorpos anti-DI baseados em detecção, como mostrado na figura 2. A primeira é um anticorpo anti-ID bloqueador de antígenos, assim denominado porque os anticorpos alvo paratope e idiotope se sobrepõem uns aos outros. Por causa disso, o antígeno alvo do medicamento anti-corpo e o anticorpo anti-DI irão competir entre si. Portanto, esta forma de anticorpo anti-ID só detectará o medicamento anticorpo livre. A segunda classificação de anticorpos anti-ID é chamada de não bloqueio porque o paratope e o idiotope do anticorpo não se sobrepõem. Portanto, o anticorpo anti-ID e o antígeno podem se ligar simultaneamente ao medicamento anticorpo sem afetar a capacidade de ligação um ao outro. Devido a isso, anticorpos anti-ID sem bloqueio são usados para detectar todas as formas de anticorpos disponíveis (livres ou ligados ao antígeno). A terceira classificação de anticorpos anti-ID é um anticorpo específico complexo anti-ID. Isto porque o anticorpo anti-ID não pode ligar-se ao medicamento anti-corpo a menos que o medicamento já esteja ligado ao seu antígeno. Portanto, este tipo de anticorpo anti-ID só é capaz de detectar anticorpos ligados ao fármaco.

Figure 2. Tipos de anticorpos anti-idiótipo. (A) Antigénio bloqueador de anti-idiótipos liga-se directamente ao local de ligação do antigénio de um medicamento anticorpo, competindo directamente com o antigénio alvo. (B) O idiótipo que os anti-idiótipos não bloqueadores também se ligam não se sobrepõe em nada ao paratope do medicamento anticorpo, permitindo que o medicamento anticorpo se ligue ao seu antigénio alvo e a um anti-ID simultaneamente. (c) Os anti-IDs específicos complexos só se ligarão ao idiótipo de um medicamento anticorpo quando esse medicamento já estiver ligado ao seu antígeno apropriado.

Usos de Anticorpos Anti-Idiótipo

Ensaios farmacocinéticos

Desde que a maioria dos anticorpos anti-ID são gerados contra um fármaco anticorpo específico, eles são comumente usados em práticas pré-clínicas para análise farmacocinética (PK). PK é o estudo do metabolismo do fármaco em todo o corpo. Especificamente, os clínicos determinarão a taxa de absorção, distribuição, biodisponibilidade e excreção de fármacos em vários coortes de pacientes. Para conseguir isso, os pesquisadores precisam ser capazes de rastrear os medicamentos anticorpos que estão vinculados ou não ao seu alvo designado em vários pontos de tempo após a entrega. Através do uso de anti-IDs, principalmente mAb’s, várias formas de terapia de anticorpos podem ser facilmente rastreadas e quantificadas no soro do paciente, sangue, urina ou outros fluidos corporais. Exemplos de ensaios farmacocinéticos (formato ELISA) usando anti-IDs são mostrados na figura 3.

Figure 3. Tipos de Ensaios PK baseados no ELISA. Existem 4 formas comuns de realizar um ensaio PK baseado no ELISA. (1) O ensaio de captura de antigénios envolve uma placa revestida de antigénios que é em voz alta para ligar um medicamento anticorpo livre. Um anti-ID rotulado é então lavado sobre a droga de anticorpos, ligado e visualizado. Um protocolo de visualização semelhante é utilizado para os outros três tipos de ensaios PK. (2) Um ensaio de anti-ID em ponte envolve uma placa revestida de anti-ID que é lavada com um medicamento anticorpo livre seguido por um anti-ID rotulado. (3) Um ensaio em sanduíche de captura de anti-ID envolve uma placa revestida de anti-ID lavada com uma IgG de região anti-constante rotulada. (4) Um ensaio de transição de antigénios anti-ID é quando uma placa revestida de antiID é lavada com um anti-corpo ligado a um antigénio rotulado.

Avaliações de imunogenicidade

Os anti-IDs policlonais são normalmente usados para ensaios de imunogenicidade como controlos de referência. A imunogenicidade é a capacidade de uma terapêutica, como um medicamento anticorpos, de induzir uma resposta imunológica humoral e/ou mediada por células, que leva ao desenvolvimento de anticorpos anti-droga (ADAs). Os ADAs levam à negação de todos os efeitos relacionados aos anticorpos, essencialmente inibindo completamente o aspecto terapêutico do medicamento, pelo que é extremamente importante que os investigadores analisem a imunogenicidade de um novo medicamento anticorpo durante a análise pré-clínica. Um ADA é muito semelhante a um anti-ID, pois ambos se ligam ao mesmo anticorpo, portanto um pool de anti-IDs policlonais pode ser usado como controle positivo ao analisar a presença de ADAs em amostras de pacientes. Um exemplo de um ensaio de imunogenicidade baseado em ELISA usando um anti-ID como controlo positivo é mostrado na figura 4.

Figure 4. Tipos de Ensaios de Imunogenicidade. (A) Se um medicamento anticorpo induz o desenvolvimento de ADAs, os ADAs podem ser visualizados através de um ELISA de ligação directa. Neste ensaio, uma placa revestida de anticorpos é lavada com soro. A placa é então lavada com um IgG rotulado que se liga apenas à região constante dos ADAs. Portanto, o ELISA só fluorescerá se houver ADAs presentes no soro da amostra. (B) Um ensaio ELISA em ponte é quando uma placa revestida de anticorpos será exposta a ADA contendo soro que se liga a uma região ScFv de um medicamento anticorpos. A restante região de ADA ScFv ligar-se-á a uma versão rotulada do mesmo medicamento anticorpo. Ambos os ensaios precisam ser analisados através de um controle positivo, como anti-IDs.

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