Ce este un anticorp antiidiotipic?

Cum se arată în figura 1, un anticorp anti-idiotipic (Anti-ID) se leagă de idiotipul unui alt anticorp, de obicei un anticorp medicament. Un idiotip poate fi definit ca fiind combinația specifică de idiotopi prezenți în cadrul regiunilor de determinare a complementului (CDR) ale unui anticorp. Un singur idiotop este o regiune specifică din regiunea Fv a unui anticorp care se leagă de paratopul (locul de legare a epitopului antigenic) unui alt anticorp. Prin urmare, un idiotop poate fi considerat aproape sinonim cu un determinant antigenic al unui anticorp.

Figura 1. Structura anticorpului anti-idiotip. (A) Paratopul unui medicament anticorp se va lega de epitopul unui antigen țintă din regiunea CDR a medicamentului anticorp. (B) Paratopul unui medicament anti-ID se va lega de idiotopul medicamentului anticorp țintă. Idiotopul se află în interiorul regiunii CDR a medicamentului anticorp și ar putea fi lângă, identic sau departe de situsul de legare a antigenului medicamentului anticorp.

Tipuri de anticorpi anti-idiotip

Există trei clasificări principale ale anticorpilor anti-ID pe bază de detecție, așa cum se arată în figura 2. Primul este un anticorp anti-ID care blochează antigenul, denumit astfel deoarece paratopul și idiotopul anticorpilor de țintire se suprapun unul cu celălalt. Din această cauză, antigenul țintă al medicamentului anticorp și anticorpul anti-ID vor intra în competiție unul cu celălalt. Prin urmare, această formă de anticorp anti-ID va detecta doar medicamentul anticorp liber. Cea de-a doua clasificare a anticorpilor anti-ID se numește non-blocantă, deoarece paratopul și idiotopul medicamentului anticorp nu se suprapun. Prin urmare, anticorpul anti-ID și antigenul se pot lega simultan de medicamentul anticorp fără a-și afecta reciproc capacitatea de legare. Din acest motiv, anticorpii anti-ID care nu blochează sunt utilizați pentru a detecta toate formele de medicament anticorp disponibil (liber sau legat de antigen). Cea de-a treia clasificare a anticorpilor anti-ID este un anti-ID specific complex. Acest lucru se datorează faptului că anticorpul anti-ID nu se poate lega de medicamentul anticorp decât dacă medicamentul este deja legat de antigenul său. Prin urmare, acest tip de anticorp anti-ID este capabil să detecteze doar medicamentul anticorp legat.

Figura 2. Tipuri de anticorpi anti-idiotip. (A) Anticorpii anti-ID care blochează antigenul se leagă direct la situsul de legare a antigenului unui medicament anticorp, intrând în competiție directă cu antigenul țintă. (B) Idiotipul de care se leagă și anti-ID-urile care nu blochează nu se suprapune deloc cu paratopul medicamentului anticorp, permițând medicamentului anticorp să se lege simultan de antigenul său țintă și de un anti-ID. (c) Anti-ID-urile specifice complexe se vor lega de idiotopul unui medicament anticorp doar atunci când medicamentul respectiv este deja legat de antigenul său corespunzător.

Utilizări ale anticorpilor anti-idiotip

Teste farmacocinetice

Din moment ce majoritatea anticorpilor anti-ID sunt generați împotriva unui medicament anticorp specific, aceștia sunt utilizați în mod obișnuit în practicile preclinice pentru analiza farmacocinetică (PK). PK este studiul metabolismului medicamentelor în tot corpul. În mod specific, clinicienii vor determina rata de absorbție, distribuție, biodisponibilitate și excreție a medicamentelor în diferite cohorte de pacienți. Pentru a realiza acest lucru, cercetătorii trebuie să fie capabili să urmărească medicamentele cu anticorpi care sunt legate sau nelegate de ținta lor desemnată în diferite momente de timp după livrare. Prin utilizarea de anti-ID, în principal mAb-uri, diverse forme de anticorpi terapeutici pot fi ușor urmărite și cuantificate în serul, sângele, urina sau alte fluide corporale ale pacienților. În figura 3 sunt prezentate exemple de teste farmacocinetice (format ELISA) care utilizează anti-ID-uri.

Figura 3. Tipuri de teste PK bazate pe ELISA. Există 4 moduri obișnuite de realizare a unui test PK bazat pe ELISA. (1) Testul de captare a antigenului implică o placă acoperită cu un antigen care este aluziv pentru a lega medicamentul anticorp liber. Un anti-ID marcat se spală apoi peste medicamentul anticorp, se leagă și se vizualizează. Un protocol de vizualizare similar este utilizat pentru celelalte trei tipuri de teste PK. (2) Un test de stabilire a unei punți Anti-ID implică o placă acoperită cu anti-ID care este spălată cu un medicament anticorp liber urmat de un anti-ID marcat. (3) Un test sandwich de captare anti-ID implică o placă acoperită cu anti-ID care se spală cu un IgG anti-regiune constantă marcat. (4) Un test anti-ID antigen-bridging este atunci când o placă acoperită cu anti-ID este spălată cu un medicament anticorp legat de un antigen marcat.

Sesizări de imunogenitate

Anti-ID policlonale sunt utilizate în mod obișnuit pentru testele de imunogenitate ca martori de referință. Imunogenitatea este capacitatea unui tratament, cum ar fi un medicament anticorp, de a induce un răspuns imun umoral și/sau mediat celular care duce la dezvoltarea de anticorpi anti-medicament (ADA). ADA-urile duc la negarea tuturor efectelor legate de medicamentul anticorp, inhibând practic complet aspectul terapeutic al medicamentului. prin urmare, este extrem de important pentru cercetători să analizeze imunogenitatea unui nou medicament anticorp în timpul analizei preclinice. Un ADA este foarte asemănător cu un anti-ID, deoarece ambele se leagă de același medicament anticorp, prin urmare, un grup de anti-ID policlonale poate fi utilizat ca martor pozitiv atunci când se analizează prezența ADA în probele pacienților. În figura 4 este prezentat un exemplu de test de imunogenitate bazat pe ELISA care utilizează un anti-ID ca și control pozitiv.

Figura 4. Tipuri de teste de imunogenitate. (A) Dacă un medicament cu anticorpi induce dezvoltarea de ADA, ADA pot fi vizualizate prin intermediul unui ELISA cu legare directă. În acest test, o placă acoperită cu un medicament anticorp este spălată cu ser. Placa este apoi spălată cu un IgG marcat care se leagă numai de regiunea constantă a ADA. Prin urmare, testul ELISA va deveni fluorescent doar dacă există ADA-uri prezente în serul de probă. (B) Un test ELISA de tranziție este atunci când o placă acoperită cu anticorpi medicamentoși va fi expusă la serul care conține ADA și care se leagă de o regiune ScFv a unui anticorp medicamentos. Regiunea ScFv ADA rămasă se va lega la o versiune marcată a aceluiași medicament anticorp. Ambele teste trebuie să fie analizate prin intermediul unui control pozitiv, cum ar fi anti-ID.

GenScripts Anti-Idiotype Anti-Idiotype Antibody Generation Packages

GenScript oferă acum pachete distincte de generare de anti-ID, care sunt specifice aplicației din aval, speciei gazdă și clonalității alese de dumneavoastră. Pachetele de generare de anti-ID de la GenScript includ….

Rodent mAb: Imunizați șoareci sau șobolani cu medicamentul dumneavoastră anticorp pentru a dezvolta anticorpi anti-ID puternici generați în doar 3 luni de timp, la un preț perfect! Produsele livrabile includ linii celulare de hibridom stabile, mAb purificat și un raport COA complet cuprinzător care analizează tipul de blocaj și testele de specificitate.

Rabbit mAb: Anticorpii anti-ID generați cu ajutorul platformei GenScripts MonoRabTM se leagă cu cea mai mare specificitate și sensibilitate de pe piață. După o analiză internă a supranaturalului clonei parentale, clonele pozitive trec prin secvențierea regiunii V, permițând o expresie recombinantă optimă a mAb-ului dumneavoastră selectat. Acest pachet include, de asemenea, livrarea garantată a unei a doua perechi de mAb anti-ID conjugate cu biotină pentru a permite generarea cu ușurință a analizelor PK bazate pe ELISA sandwich.

Rabbit pAb: PAb de iepure de la GenScript oferă un timp de execuție și o gamă de prețuri convenabile pentru clienții interesați în utilizarea de anti-ID policlonale pentru analiza imunogenității. Utilizând protocolul nostru de generare expresă a anticorpilor și un proces extins de purificare și screening, pAb-urile anti-ID de iepure GenScript sunt o opțiune de încredere pentru următorul dumneavoastră proiect.

Click aici pentru a afla despre produsele gata făcute de anticorpi anti-idiotip împotriva medicamentelor de succes.

.